"MB49 epithelioid cells小鼠膀胱癌細胞系 細胞背景資料:膀胱癌;雄性;C57BL/Icrfa(t) 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! L 1210細胞系相關產品:BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞 SU86.86細胞系相關產品:NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞 SNU216細胞系相關產品:MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞 細胞生長:貼壁 MB49 epithelioid cells小鼠膀胱癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HMO6細胞系相關產品:NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞 159PT細胞系相關產品:NCI-H2122細胞、SuDHL 8細胞、CCD-1112sk細胞 L-1210細胞系相關產品:Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞 FHC細胞系相關產品:HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞 Hs578Bst細胞系相關產品:RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 MB49 epithelioid cells小鼠膀胱癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 DHL-8細胞系相關產品:NS-1細胞、CAL-51細胞、PTK 2細胞 HGC-27細胞系相關產品:FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞 Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關產品:MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞 MDA-MB-330細胞系相關產品:U-226AR1細胞、SNU-216細胞、HLE B-3細胞 NRK clone 52E細胞系相關產品:PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞 639V細胞系相關產品:Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞 NCI-SNU-1040細胞系相關產品:DHL-2細胞、NIE 115細胞、H-1417細胞 HCC15細胞系相關產品:FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞 hCMEC/D3細胞系相關產品:SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞 H-1703細胞系相關產品:Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞 MB49 epithelioid cells小鼠膀胱癌細胞系 MM-1S細胞系相關產品:C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞 KMS11細胞系相關產品:B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞 alpha TC1.6細胞系相關產品:HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞 BE2-C細胞系相關產品:HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞 HBL 100細胞系相關產品:RKOE6細胞、HCT 8細胞、ZR751細胞 MDAMB361細胞系相關產品:HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞 MDAMB361細胞系相關產品:HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞 aTC1-6細胞系相關產品:WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞 H-1838細胞系相關產品:SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞 MMAc-Serum Free細胞系相關產品:OCI-Ly18細胞、TE-4細胞、KTCTL140細胞 NCI-SNU-668細胞系相關產品:B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞 hTERT RPE1細胞系相關產品:RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞 KM.12細胞系相關產品:HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞 FLS細胞系相關產品:Hs68細胞、PC10細胞、SNU484細胞 RS411細胞系相關產品:NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞 LN 229細胞系相關產品:RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞 MyLa 2059細胞系相關產品:B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞 KE-37細胞系相關產品:KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞 HEC251細胞系相關產品:CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞 L- cell細胞系相關產品:UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞 EoL-1 cell細胞系相關產品:Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞 BE(2)M17細胞系相關產品:Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞 Rat 2細胞系相關產品:AR4IP細胞、TEV-1細胞、253J B-V細胞 Alexander cells細胞系相關產品:HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞 Hs746T細胞系相關產品:CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞 GM637細胞系相關產品:OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞 A172細胞系相關產品:OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞 RWPE2細胞系相關產品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞 JEG3細胞系相關產品:L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞 SW-954細胞系相關產品:HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞 NCI-H1793細胞系相關產品:Sol8細胞、Colo-678細胞、H-2135細胞 GC-2細胞系相關產品:OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞 HEL-92_1_7細胞系相關產品:SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞 JHH-7細胞系相關產品:GM03671細胞、Hs_578t細胞、HBE 135-E6E7細胞 SMA 560細胞系相關產品:HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞 OVCAR-4細胞系相關產品:WML2細胞、MBT2細胞、H-2591細胞 P-36細胞系相關產品:HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞 H-1944細胞系相關產品:SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞 SGC 7901細胞系相關產品:U-2932細胞、UK Pan-1細胞、P30/0HK細胞 PCI-4.2細胞系相關產品:CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞 OB2細胞系相關產品:Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞 SUDHL-10細胞系相關產品:MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞 CCD 841 CoN細胞系相關產品:SUD4細胞、DF-1細胞、GM05887A細胞 HIBEpiC細胞系相關產品:HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞 OVCAR 420細胞系相關產品:Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞 OK-WT細胞系相關產品:BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞 RKOE6細胞系相關產品:SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞 H1385細胞系相關產品:MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞 746T細胞系相關產品:MNNG-HOS (Cl#5)細胞、PC3M-2B4細胞、VM-CUB1細胞 H-1623細胞系相關產品:HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞 MDA-1386細胞系相關產品:786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞 MB49 epithelioid cells小鼠膀胱癌細胞系 EU-3細胞系相關產品:PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞 Hs675細胞系相關產品:H-1755細胞、FHs74 Int細胞、ECC-12細胞 HT 1080細胞系相關產品:KG1A細胞、SKOV-433細胞、SW-480細胞 Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關產品:MDA157細胞、A431/P細胞、MCF-7B細胞 "
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