"MDA-MB-435 Adherent人乳腺癌細胞系
細胞背景資料：乳腺癌
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MDA-MB-435 Adherent人乳腺癌細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。
Hs 578.Bst細胞系相關產品：H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞
MS-751細胞系相關產品：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
MDA-MB-175VII細胞系相關產品：H-2108細胞、SF767細胞、BNL-HCC細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
MFM223細胞系相關產品：TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞
MFM223細胞系相關產品：TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞
KCL22細胞系相關產品：GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞
細胞生長特性：貼壁
MDA-MB-435 Adherent人乳腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數，傳相應數目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
NBL-2細胞系相關產品：NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞
Hs940-T細胞系相關產品：NCI-H2228細胞、SNU-886細胞、DMS 79細胞
GC1-SPG細胞系相關產品：SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞
GP293細胞系相關產品：KU 812細胞、CL-11細胞、BMSC/hBMSCs細胞
C26細胞系相關產品：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
NCI-H2330細胞系相關產品：SW 403細胞、NCI-H820細胞、MFC細胞
NCL-H548細胞系相關產品：MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞
RASMCs細胞系相關產品：U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞
LTEP-sm細胞系相關產品：NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞
IHHA-1細胞系相關產品：G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞
TMK1細胞系相關產品：HMEC細胞、NCIH1819細胞、RSC-96細胞
67NR細胞系相關產品：Hs839T細胞、H2195細胞、LLCMK2細胞
ECC-10細胞系相關產品：LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
MDA-MB-435 Adherent人乳腺癌細胞系
NCI-H1355細胞系相關產品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
NCI-H128細胞系相關產品：UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞
MCA38細胞系相關產品：U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞
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C4-2 Bone metastatic細胞系相關產品：H-82細胞、SW-527細胞、NBL-7細胞
RAT2細胞系相關產品：Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞
GM01232細胞系相關產品：Tu212細胞、32D.3細胞、J82 COT細胞
SUM149細胞系相關產品：KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞
OCI Ly10細胞系相關產品：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
COLO 678細胞系相關產品：OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞
PNEC30細胞系相關產品：Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞
CHP-212細胞系相關產品：RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞
MESSADX5細胞系相關產品：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
B78細胞系相關產品：RPMI6666細胞、SW-1783細胞、ASH3細胞
REC-1細胞系相關產品：NCI-H-82細胞、MDA-MB 361細胞、SY5Y細胞
NCI-H2135細胞系相關產品：DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞
NCI-H1793細胞系相關產品：Sol8細胞、Colo-678細胞、H-2135細胞
KM933細胞系相關產品：Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
786-0WT細胞系相關產品：PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞
NCI-SNU-119細胞系相關產品：NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞
KYSE 180細胞系相關產品：H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞
RPMI No. 1846細胞系相關產品：NCI-H2081細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、SK-OV-3細胞
KG-1細胞系相關產品：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞
SKMEL-1細胞系相關產品：Walker256細胞、ST 486細胞、MC3T3-E1細胞
NSH細胞系相關產品：THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
COLO320/DM細胞系相關產品：Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
HIT細胞系相關產品：SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞
OCI-Ly8細胞系相關產品：FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞
GM02131細胞系相關產品：NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
JiyoyeP-2003細胞系相關產品：UCLA SO M14細胞、B5537SKIN細胞、Panc813細胞
NCI-H446細胞系相關產品：WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞
MGHU1細胞系相關產品：WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞
K 562細胞系相關產品：Walker/LLC-WRC 256細胞、RPMI2650細胞、H-1568細胞
MDA-MB468細胞系相關產品：MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞
KHYG細胞系相關產品：Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞
A2780細胞系相關產品：RMG1細胞、Sf21細胞、CCD 841 CoTr細胞
SGC996細胞系相關產品：HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞
MDA330細胞系相關產品：Pt K2細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞、ROS-17/2.8細胞
Bovine Turbinate細胞系相關產品：MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞
HCT/FU細胞系相關產品：Hs 27細胞、Panc-1-P細胞、HUVSMC細胞
HCT-15細胞系相關產品：HEK293E細胞、J-82細胞、U373 MG細胞
HT clone H9細胞系相關產品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
MDA-MB-435 Adherent人乳腺癌細胞系
Panc02細胞系相關產品：P815細胞、KTA-7細胞、CHOS細胞
NCI-H847細胞系相關產品：Namalwa細胞、NCI-H-128細胞、IPLB-SF 21AE細胞
HEK 293 c18細胞系相關產品：HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
U343細胞系相關產品：HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
YES-2細胞系相關產品：NCI-H889細胞、OCI-LY-18細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞
9L細胞系相關產品：ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞
TEC細胞系相關產品：BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
WI38細胞系相關產品：NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞
A431細胞系相關產品：HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞
H2029細胞系相關產品：CAL27細胞、HSC/mHSC細胞、NCTC1469細胞
HEK-293細胞系相關產品：Ramos 2G6.4C10細胞、MDA.MB.435細胞、H1341細胞
GC1-SPG細胞系相關產品：SaOS-2細胞、X63-Ag8.653細胞、U266 Bl細胞
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