"CPAE Adherent牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:肺血管;內(nèi)皮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CPAE Adherent牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
HHFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞
PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES1細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞
T47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR-42J細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Line 870 Emory University-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoTr細(xì)胞、U343細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞
TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞
SCL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 1469細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
CPAE Adherent牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
RDES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 78細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞
TE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞
OVCAR8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4 Ig-24細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞、LN229細(xì)胞
ChaGo K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCH1細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞
EB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞
L-Wnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hk-2細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞
E0771細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞、kms 11細(xì)胞
R3/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JS1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞、HSC2細(xì)胞
C4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80UBC細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞
RGCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES-1細(xì)胞、C81-61細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞
EC-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRIF細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞
B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞
HTR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2330細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞、V 79細(xì)胞
CPAE Adherent牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
Ketr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C42細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞
H-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC-1細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞
SJRH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEL細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞
SJRH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEL細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞
HA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS/MNNG細(xì)胞、UCW 100細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞
SCL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 1469細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞
PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞
PK (15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404D細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞
MC116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839.T細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞
NS1-Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2196細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞、SW-626細(xì)胞
NIH-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-4細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞、HA1800細(xì)胞
NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB 106細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞
CC-LP-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA Dx5細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞、OVHM細(xì)胞
HTR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2330細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞、V 79細(xì)胞
SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGP細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞、Ly7細(xì)胞
Namalwa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 253細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞
LM TK negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1088細(xì)胞、P3J細(xì)胞、HR1K細(xì)胞
GM00637I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH292細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞
HCC0095細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ha Fe細(xì)胞、L-1210細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞
Jurkat FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-1395細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞、SNK6細(xì)胞
MDA MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS-9L細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞
INS1-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801-95D細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞
MHCC97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞
H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞、GM2131細(xì)胞
SNU668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3M細(xì)胞、H-446細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞
JROECL 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BI-Mel細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞
NCI-H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO III細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞
RS 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞
OV2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4/1細(xì)胞、HRC-99細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞
MC3T3E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc10.05細(xì)胞、RH7777細(xì)胞、UT7細(xì)胞
OCI/AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRMECs細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、PC.3細(xì)胞
751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NEP-1細(xì)胞、H-1792細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞
SW 839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL 4細(xì)胞、TT細(xì)胞、FU-97細(xì)胞
P3J.HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞
LL/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-436細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞
Wistar Institute-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK(15)細(xì)胞、WM115細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞
HIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞
M 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.cl3細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞、639 V細(xì)胞
SNU-368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML12細(xì)胞、MS 751細(xì)胞、5-8F細(xì)胞
NCC-IT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2198細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞
ONS-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3D4/21細(xì)胞、SC細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞
CPAE Adherent牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
UMR 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞
MDA-MB-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞、SCC090細(xì)胞
WM239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-IE8細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞
U 937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAHY-926細(xì)胞、N1S1細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞
CCRFCEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM-1S細(xì)胞、SR786細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞
149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-4細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞
M-07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞
OE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞
Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細(xì)胞、L428細(xì)胞、L-132細(xì)胞
TB1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_HEP1細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞
OVCAR8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞
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