"CPAE Cell:牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:肺血管;內(nèi)皮細(xì)胞
OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞
VP303細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞
D562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-PaCa-2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞
K299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL34細(xì)胞、H-2347細(xì)胞、NK-92細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
CPAE Cell:牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長的,尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞,單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以,消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài),這個(gè)啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè),因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到70%左右的時(shí)候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時(shí)候如果是用無血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多,還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn):傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時(shí)間,等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來的時(shí)候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時(shí)間,不能時(shí)間太過了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候,或者臨時(shí)沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NIH:OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 52E細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞、SR細(xì)胞
COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL1細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞
HN4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA4細(xì)胞、MDA361細(xì)胞、H-1618細(xì)胞
MDCKII-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-SF細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞、JVM2細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
CPAE Cell:牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
H1650_CO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNGM細(xì)胞、SW948細(xì)胞、H295R細(xì)胞
10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞
Ramos (RA)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、H19-7細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞
Ls-174-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H87細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞、RMS13細(xì)胞
HEP3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hos TE-85細(xì)胞、H647細(xì)胞、HMSC細(xì)胞
no-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaca.2細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞、HRIF細(xì)胞
MPP-89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno-293細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞
CPAE Cell:牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
TO175T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT167細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞
MX1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BXPC3細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞
SJSA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L2細(xì)胞、CL34細(xì)胞、SHG44細(xì)胞
H-1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞
AE 1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 134VI細(xì)胞、HOS細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞
Eca 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910/PM細(xì)胞、PC 12細(xì)胞、SNU869細(xì)胞
NCI-H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepaRG細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
MDA453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT-6細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞
Huh 7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa2細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞
BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-774細(xì)胞、A2780細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞
SNU761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1694細(xì)胞、H1755細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞
OV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McG-1細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞、PANC-03-27細(xì)胞
MCF.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP1細(xì)胞、HCEC細(xì)胞、AGS細(xì)胞
H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T3細(xì)胞、AML193細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞
SK-RC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-15細(xì)胞、HT1080細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞
beta TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1788細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、STTG1細(xì)胞
624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCMEC細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞
K7M2-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW.620細(xì)胞、CMT93細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞
SUPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05887A細(xì)胞、JAR細(xì)胞、Tu177細(xì)胞
Hs888T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞、GOS3細(xì)胞
Balb/c3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細(xì)胞、DLM8細(xì)胞、BL6細(xì)胞
CT-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞
TE-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4:11細(xì)胞、CHOS細(xì)胞、NCI-H820細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
Eca-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL1細(xì)胞、F-36P細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞
U-373MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞
Panc02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2198細(xì)胞、U118MG細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞
NCIH2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞
C2C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY5Y細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞
INS1-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801-95D細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞
K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞
SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞
GM03570E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-2細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞
WM 239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164 TC細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞
ABC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-852-T細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞
KMS11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞
Neuro-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBSMC細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞、Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞
Lewis lung carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duck embryo細(xì)胞、293H細(xì)胞、WERI-Rb1細(xì)胞
KYSE 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞
H-1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo699細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞
CPAE Cell:牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞
SUM102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPAE細(xì)胞、GS9L細(xì)胞、H2.35細(xì)胞
PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK-2細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞
MCF12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hs 68細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞、TM4細(xì)胞
HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞
NCIH1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OP-9細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞
EoL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG-01細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞
HGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE12細(xì)胞、RC92A細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞
CWR-22rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-929細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞、DF-1細(xì)胞
LPC-H12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 42細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞
Panc 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA317細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞
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