"LLC-WRC 256 AdherentWalker氏癌肉瘤256瘤細胞系
細胞背景資料:乳腺癌;雌性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增高,pH值改變,部分蛋白質由于上述原因而變性,引起細胞內部空間結構紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內結構成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內容物丟失。如果細胞內冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內水分,減少細胞內冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內的水分滲出細胞外,減少胞內形成冰結晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
LLC-WRC 256 AdherentWalker氏癌肉瘤256瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
Hs839T細胞系相關產(chǎn)品:U-87MG ATCC細胞、PANC0203細胞、SK-Hep1細胞
BALB/3T3 (clone A31)細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR5細胞、MUTZ3細胞、BNL CL2細胞
RCC10 RGB細胞系相關產(chǎn)品:HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A375-S2細胞系相關產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
NCIH660細胞系相關產(chǎn)品:UCLA-SO-14細胞、UM-RC-2細胞、KAT5細胞
IEC 18細胞系相關產(chǎn)品:H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞
細胞生長特性:貼壁
LLC-WRC 256 AdherentWalker氏癌肉瘤256瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳;血清使用錯誤或血清的品質不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉軸中心與離心套管底部內壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
Hs 688(A).T細胞系相關產(chǎn)品:SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
SW 837細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
Toledo細胞系相關產(chǎn)品:G-361細胞、H-295細胞、KP4細胞
U373細胞系相關產(chǎn)品:ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
675T細胞系相關產(chǎn)品:L-428細胞、VM-CUB-I細胞、FRTL 5細胞
H341細胞系相關產(chǎn)品:MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
MLE 12細胞系相關產(chǎn)品:MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞系相關產(chǎn)品:Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞
CPA47細胞系相關產(chǎn)品:C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞
PANC-1細胞系相關產(chǎn)品:HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞
GM 2132細胞系相關產(chǎn)品:GM04154B細胞、GI-1細胞、EFM-192A細胞
32D.3細胞系相關產(chǎn)品:TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
PC-3M-IE8細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
LLC-WRC 256 AdherentWalker氏癌肉瘤256瘤細胞系
LTEP-s細胞系相關產(chǎn)品:IEC6細胞、CCRF-CEM/S細胞、TR 146細胞
TEV-1細胞系相關產(chǎn)品:4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞
OP9細胞系相關產(chǎn)品:SNU354細胞、P3X63 Ag8細胞、HCC-1187細胞
OP9細胞系相關產(chǎn)品:SNU354細胞、P3X63 Ag8細胞、HCC-1187細胞
H2195細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞
EOC 20細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE(1)n細胞、HRMC細胞、CORL23細胞
AtT-20細胞系相關產(chǎn)品:H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關產(chǎn)品:HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞
MOLP2細胞系相關產(chǎn)品:MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞
SKRC-20細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞
BC-028細胞系相關產(chǎn)品:FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
WSU-DLCL-2細胞系相關產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞
CL11細胞系相關產(chǎn)品:HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞
JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關產(chǎn)品:JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞
Calu-6細胞系相關產(chǎn)品:GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞
BrCL12細胞系相關產(chǎn)品:LM2-4175細胞、HM06.A1細胞、EOL1細胞
Mono-Mac-6細胞系相關產(chǎn)品:KP-N-NS細胞、OSA細胞、P 815細胞
C8166細胞系相關產(chǎn)品:T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
INS1-E細胞系相關產(chǎn)品:PLA801-95D細胞、WEHI 3B細胞、COLO 699細胞
OLN-93細胞系相關產(chǎn)品:SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞
Rat Glomerular Endothelial細胞系相關產(chǎn)品:NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞
Michigan Cancer Foundation-12A細胞系相關產(chǎn)品:NBL-12細胞、HSC/mHSC細胞、CAL27細胞
SEM細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
Colo16細胞系相關產(chǎn)品:HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞
LTEP a2細胞系相關產(chǎn)品:P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
LCD細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞
HCC366細胞系相關產(chǎn)品:L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞
Mel624細胞系相關產(chǎn)品:NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞
WTRL1細胞系相關產(chǎn)品:AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞
Sp2/O細胞系相關產(chǎn)品:X63-AG 8.653細胞、OUMS-23細胞、SCC4細胞
SUNE-1細胞系相關產(chǎn)品:D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
PFSK細胞系相關產(chǎn)品:NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞
TOV-112D細胞系相關產(chǎn)品:ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞
As-PC1細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-435-S細胞、U373細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
3D4/21細胞系相關產(chǎn)品:32D CL3細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞、TFH細胞
MRC-9細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
SK ES 01細胞系相關產(chǎn)品:MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞
LUDLU-1細胞系相關產(chǎn)品:HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞
Hs 683細胞系相關產(chǎn)品:RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞
OE-21細胞系相關產(chǎn)品:Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞
KM12SM細胞系相關產(chǎn)品:OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞
hTERT-HME1細胞系相關產(chǎn)品:A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞
LLC-WRC 256 AdherentWalker氏癌肉瘤256瘤細胞系
MHCC97-H細胞系相關產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞
OVCAR10細胞系相關產(chǎn)品:U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞
H.Ep.-2細胞系相關產(chǎn)品:SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞
SKMEL5細胞系相關產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
SK_HEP1細胞系相關產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞
HHFK細胞系相關產(chǎn)品:HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
Caco2-BBE細胞系相關產(chǎn)品:Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞
GM-346細胞系相關產(chǎn)品:OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞
Hs 683細胞系相關產(chǎn)品:RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞
L615細胞系相關產(chǎn)品:GM02132C細胞、NCI-H2108細胞、Panc2_03細胞
Evsa T細胞系相關產(chǎn)品:SF-539細胞、H2106細胞、Hs 636.T細胞
Toledo細胞系相關產(chǎn)品:G-361細胞、Hs739T細胞、KP-N-RT-BM細胞
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