"SVG p12 Adherent人星形膠質(zhì)細胞系
細胞背景資料：星形膠質(zhì)細胞；SV４０轉(zhuǎn)化；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
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細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
H-250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H520細胞、Functional Liver Cell-7細胞、OUMS-27細胞
H-1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞
NCIH187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
130T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞
T98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞
MDAMB175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FCCH1018細胞、Reuber H-35細胞、H292細胞
細胞生長特性：貼壁
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細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
NCI-H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 684細胞、D6P2T細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞
SKNF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAC-84細胞、SNU638細胞、AtT-20細胞
T98-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
Dakiki細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞
SUM 102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞
RBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc.SF細胞、NK92MI細胞、H747細胞
HCC0044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞
3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-109細胞、NB-4細胞、BDCM細胞
NCIH1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CW2細胞、SUM52PE細胞、SVEC 4-10細胞
COLO-320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞
HO1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
MDA-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
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BC-009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7細胞、L-540細胞、Pt-K1細胞
MCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
C-Lu65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞
C-Lu65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞
SKMES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-04B細胞、MDBK細胞、GES1細胞
NCI-H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞
L615細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞
Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
Y3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN205細胞、MuM-2B細胞、hRMECs細胞
MA-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69/P細胞、UMUC-3細胞、Alexander cells細胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1623細胞、H-719細胞、OVSAHO細胞
ROS17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI細胞、HOS TE 85細胞、SKNAS細胞
Panc10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUGCHOR1細胞、MLE-12細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞
PLB-985細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞
HeLaS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞
B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
NBL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞
H-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP-1細胞、UPCI-SCC090細胞、CPAE細胞
KMBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞
HCC1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞
HuPT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞
U118細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-2細胞、GM17346細胞、MRAEC細胞
COLO-320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-12細胞、LLCMK2細胞、SSP-25細胞
Human Hepatocyte Line 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞
RS4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞
TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
NCIH747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
ECV304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞
NALM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA)細胞、IPEC-J2細胞、CTV1細胞
LAPC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
NCIH2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1.0細胞、SK-N-BE(1)細胞、LA 4細胞
HTori-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞
Hs729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIHOVCAR3細胞、EJ細胞、MDA361細胞
TE-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞
HEH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞
OCI/AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞
LU65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130 T細胞、H2405細胞、SW 1573細胞
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞
MCF.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP1細胞、HCEC細胞、AGS細胞
T9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801D細胞、CWR22-R1細胞、NCIH250細胞
SVG p12 Adherent人星形膠質(zhì)細胞系
H-2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞
SW-1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa/S3細胞、HEK293T/17細胞、DLD 1細胞
HEC251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞
ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞
Hs737T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞
SRA01/04 (HLE)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞
H7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
CA 46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC3細胞、CATH-a細胞、MFE-296細胞
NCIH1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-T1細胞、H-4細胞、Th17細胞
T98-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-28細胞、WEHI 164細胞、HEL細胞
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