"STC-1 Adherent小鼠小腸內(nèi)分泌細胞系
細胞背景資料:STC-1細胞來源于雙重轉(zhuǎn)基因小鼠的腸腫瘤組織。含有連接大鼠胰島素基因啟動子與多瘤病毒小T抗原的融合基因與含有連接大鼠胰島素基因與SV40的基因結(jié)合產(chǎn)生雙轉(zhuǎn)基因小鼠。這些小鼠一般患有腸腫瘤以及胰腺β細胞瘤。STC-1細胞產(chǎn)生激素分泌素。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
STC-1 Adherent小鼠小腸內(nèi)分泌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
NKL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞
PC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞
AGS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
W256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞
Pa14C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞
HLEC-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞
細胞生長特性:貼壁
STC-1 Adherent小鼠小腸內(nèi)分泌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞
HCC95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
L-5178-Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞
CD18/HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-9細胞、RL95-2細胞、Chinese Hamster Lung細胞
M-07e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細胞、TGW-nu-1細胞、NCI-H2108細胞
JB 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞
SKMES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞
MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞
MKN 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞
A431/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞
Molm 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
Z-138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞
H7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞
STC-1 Adherent小鼠小腸內(nèi)分泌細胞系
MDA-MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hUC-MSC細胞、CZ-1細胞、SUM-102細胞
MDA-MB-435 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞
Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
RCC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞
NHDF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 33細胞、UCLA-SO-M21細胞、D341 Med細胞
MCA205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞
SKHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
OKAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞
Madin Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU65細胞、JB6 [Mouse]細胞、H1623細胞
COLO-320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-12細胞、LLCMK2細胞、SSP-25細胞
H-1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
FRTL-5 Cl 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8.653細胞、HUCEC細胞、MCF-7/AdrR細胞
H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞
KOSC-2 cl3-43細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞
MPC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞
LN 382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-FI細胞、T98G細胞、HuNS1細胞
SW1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞
SUDHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞
RKO_AS45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
SO-RB50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞
beta TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞
MDA MB 134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
FL 62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞
MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
HEK293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
EC-9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-s細胞、BaF3細胞、G292細胞
PNT1-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
Tu686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞
TE 671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞
VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
GL261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞
BERH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1-S細胞、HL-7702細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞
Super Tube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞
AR4-IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3 HeLa細胞、Scott and White No. 13細胞、Rat Fetal Lung-6細胞
W133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN 4細胞、UPCISCC090細胞、Sp2/0細胞
RS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
STC-1 Adherent小鼠小腸內(nèi)分泌細胞系
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞
L5178Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
PASMCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞
NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
MDAMB134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R2C細胞、HCC0015細胞、RPMI 1846細胞
RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
Scott and White No. 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞
HS-445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC.3細胞、HLE-SRA-01/04細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞
PASMCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞
H-1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB.19細胞、NPA 87細胞、H226細胞
Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 52細胞、SGC 7901細胞、Panc8.13細胞
L-5178-Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPE-int細胞、U-937細胞、JB-6細胞
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