"STC-1 Cell:小鼠小腸內(nèi)分泌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:STC-1細胞來源于雙重轉(zhuǎn)基因小鼠的腸腫瘤組織。含有連接大鼠胰島素基因啟動子與多瘤病毒小T抗原的融合基因與含有連接大鼠胰島素基因與SV40的基因結(jié)合產(chǎn)生雙轉(zhuǎn)基因小鼠。這些小鼠一般患有腸腫瘤以及胰腺β細胞瘤。STC-1細胞產(chǎn)生激素分泌素。
H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR 20細胞、C28/I2細胞、Functional Liver Cell-7細胞
SKMEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
HCA-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞
SUDHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
STC-1 Cell:小鼠小腸內(nèi)分泌細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NS-I/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3J2細胞、WRL-68細胞、SNUC2B細胞
Pt K2 (NBL-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞
Y3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN205細胞、MuM-2B細胞、hRMECs細胞
SK Mel28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
NCI-H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞
細胞生長特性:貼壁
STC-1 Cell:小鼠小腸內(nèi)分泌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
PL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞
CHP100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
COLO824細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87MG細胞、G422細胞、H146細胞
HEP3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
OC316細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞
NCI H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-606-T細胞、HPAF/CD18細胞、KGN細胞
CNE2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOU-NH-91細胞、COS-1細胞、CNE細胞
STC-1 Cell:小鼠小腸內(nèi)分泌細胞系
NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞
Colon-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM/0細胞、786-0WT細胞、LTEP-s細胞
NCIH2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FD-LSC-1細胞、CCD1095Sk細胞、CT26.WT細胞
MLFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞
MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM TK negative細胞、MDAMB175細胞、OVCAR 5細胞
MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1963細胞、WEHI 231細胞、P3X63Ag8653細胞
QSG-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞
ARH-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞
ARH-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞
Ramos (RA)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 clone A31細胞、H19-7細胞、Nb-2細胞
LLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞
GM05372E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU423細胞、NBL-7細胞、L5178YR細胞
GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞
LU451細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82 COT細胞、NCI-H1238細胞、MRC 5細胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞
EAhy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86_86細胞、SK-MES-1細胞、huH 1細胞
OVCA433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
CEM-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:33604細胞、NCIH1341細胞、NB1-RGB細胞
LS 123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS1034細胞、GRSL細胞、YTMLC-90細胞
RPMI1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
NCIH23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞
NIH3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
16HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞
A204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 102細胞、KY-270細胞、TK10細胞
NCI747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
Hs 578.Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞
PANC0504細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN1細胞、HIT細胞、SK-MEL-24細胞
MAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞
CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
PANC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞
LAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞
Farage細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 52E細胞、NTera2/D1細胞、H-1522細胞
Hep G2-Luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
PZ-HPV-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞
MBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞
UPCISCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、2PK-3細胞、3T3F442A細胞
UCLA-SO-M20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2935細胞、Henrietta Lacks cells細胞、BC-3H-1細胞
LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞
SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞
BC-019細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞
OB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
RH35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606T細胞、SK-N-BE(2)C細胞、HCE-T細胞
STC-1 Cell:小鼠小腸內(nèi)分泌細胞系
Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞
SJ-RH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
NRK49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
FRO 81-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE1細胞、Ect1/E6E7細胞、IMCD3細胞
Tn-5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC-19細胞、MNNG-HOS細胞、HL-60 Clone 15細胞
SU-86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
IOSE-Mar細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞
Hs-578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞
Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞
BHK21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞
3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me-Wo細胞、MSTO211H細胞、C3H10T1/2細胞
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