"NCTC 1469 Cell:小鼠正常肝細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:1952年建系,源于正常C3H/An小鼠的肝臟組織,表達H-2K抗原,鼠痘病毒陰性。
CV-1.K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVMANA細胞、Ku812F細胞、RH8994細胞
NCIH211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-10細胞、MDA-361細胞、NCI-H740細胞
CHO K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
NRK-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCTC 1469 Cell:小鼠正常肝細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KLM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞
NCIH661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞
Functional Liver Cell-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞
WIL2-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
細胞生長特性:貼壁
NCTC 1469 Cell:小鼠正常肝細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
SF295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
3T3-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
T98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
MDA-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS(TE85)細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞、OC 316細胞
G519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞
JHH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
NCTC 1469 Cell:小鼠正常肝細胞系
NCIH1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570E細胞、COLO-738細胞、TOV112D細胞
kms 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞
UCLA NPA871細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞
NIH:OVCAR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞
COLO684細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP5d細胞、MDA134細胞、SNUC1細胞
SK-MES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
KS-SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞
BSC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞
SW 982細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
SW 982細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
RPMI 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63.Ag8.653細胞、BEAS 2B細胞、SU-DHL-4細胞
GM02131細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
RCC 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
H2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
Human Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞
H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV1細胞、HT55細胞、NL20細胞
PaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
NKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZYM-SVEC01細胞、SCL-1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞
Mono Mac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
MB-49細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT29細胞、KOPN-8細胞、UC-3細胞
PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1694細胞、hEEC細胞、HCT116細胞
KYSE410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞
IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
NRK 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞
X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH211細胞、GC9811-P細胞、NCI-BL1339細胞
A2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-480細胞、AMC-HN8細胞、A7r5細胞
MC26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞
2780CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
HRVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
TCC Sup細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞
KALS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH209細胞、2BS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞
Hs 695.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞
NHRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞
SNU407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞
GDM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞
MCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞
KP-N-RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞
NCTC 1469 Cell:小鼠正常肝細胞系
HCC94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2218細胞、AN-3細胞、H2227細胞
H-735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞
SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
P30/Ohkubo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
HOP-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK2細胞、HUTU80細胞、T24細胞
GBCSD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
VMRCRCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
COLO-320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-12細胞、LLCMK2細胞、SSP-25細胞
MESSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞
Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2330細胞、HBZY 1細胞、B16F0細胞
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