"Fao Adherent小鼠肝癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Fao Adherent小鼠肝癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。
A-172細胞系相關產品:SK Mel 2細胞、HPAF-2細胞、KALS-1細胞
HEK293FT細胞系相關產品:U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞
Hs-675-T細胞系相關產品:HO8910細胞、C4 I細胞、RPMI-8226S細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Y3-Ag123細胞系相關產品:C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
HGMC細胞系相關產品:MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞
RTE細胞系相關產品:ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
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細胞形態(tài)特性:上皮細胞
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
SPCA-1細胞系相關產品:Hs-688A-T細胞、BC-020細胞、CAL62細胞
H889細胞系相關產品:MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
L M (TK-)細胞系相關產品:UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞
DoHH-2細胞系相關產品:MSCs(mUCMSCs)細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞
EoL-1-cell細胞系相關產品:BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
SK-MEL-5細胞系相關產品:H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
HDLM2細胞系相關產品:HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞
EA.Hy926細胞系相關產品:NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞
Jurkat-77細胞系相關產品:Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞
KATOIII細胞系相關產品:NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
TCCPAN2細胞系相關產品:HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
HuCC-T1細胞系相關產品:HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞
Caco2-BBE細胞系相關產品:Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞
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Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關產品:QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞
HS-683細胞系相關產品:HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
NOR10細胞系相關產品:NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞
NOR10細胞系相關產品:NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞
T47-D細胞系相關產品:L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞
H295R-S1細胞系相關產品:AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞
MC-4細胞系相關產品:SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞
H810細胞系相關產品:C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞
KU 812F細胞系相關產品:RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
PVEC細胞系相關產品:L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞
H-735細胞系相關產品:P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞
LS-174T細胞系相關產品:H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞
As-PC1細胞系相關產品:MDA-MB-435-S細胞、U373細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
HCC2218細胞系相關產品:Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
Lieming Xu-2細胞系相關產品:HSC細胞、H810細胞、U251n細胞
TOV21細胞系相關產品:H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞
NCIH1184細胞系相關產品:AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
HCC-1833細胞系相關產品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
639 V細胞系相關產品:CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞
H4IIE細胞系相關產品:H-1975細胞、M109細胞、C4I細胞
U118-MG細胞系相關產品:SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞
CL 1-0細胞系相關產品:HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞
hTERT-RPE細胞系相關產品:NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞
H2009細胞系相關產品:MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
COV 504細胞系相關產品:HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞
GC-1 spg細胞系相關產品:NCI-H3255細胞、CHL-CL-11細胞、NMC-G1細胞
2B4細胞系相關產品:MOPC細胞、PK 15細胞、KY180細胞
FRTL-5細胞系相關產品:Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞
IA-LM細胞系相關產品:CCD-19Lu細胞、H2009細胞、H-220細胞
SJRH 30細胞系相關產品:NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞
RT-112細胞系相關產品:C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
SJRH 30細胞系相關產品:NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞
BCaP-37細胞系相關產品:HCT-FET細胞、High Five細胞、H22-H8D8細胞
H2052_MM細胞系相關產品:SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
HPAF2細胞系相關產品:EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
NCI-H1882細胞系相關產品:HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞
MOLM-13細胞系相關產品:NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞
MOLM-13細胞系相關產品:NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞
Hs839.T細胞系相關產品:SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞
HOS-MNNG細胞系相關產品:GB1細胞、HUC細胞、H187細胞
Hs68細胞系相關產品:DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞
NCI-H820細胞系相關產品:P31/FUJ細胞、Caco 2細胞、HHUA細胞
Fao Adherent小鼠肝癌細胞系
CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關產品:H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞
B 95-8細胞系相關產品:DHL-4細胞、HR8348細胞、OCI-Ly 8細胞
PE CA PJ34細胞系相關產品:H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞
KYSE520細胞系相關產品:TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞
SK.MEL.28細胞系相關產品:H-1770細胞、U-251細胞、Z138細胞
SNU-886細胞系相關產品:SuDHL 2細胞、RBL 1細胞、MIN-6細胞
VP229細胞系相關產品:SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞
LUDLU 1細胞系相關產品:HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞
MDA468細胞系相關產品:QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
L6565細胞系相關產品:GM00637F細胞、CEMx721.174.T2細胞、HMC-1細胞
AML-2細胞系相關產品:OCI-Ly7細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、L-6TG細胞
L- cell細胞系相關產品:UMR 106細胞、MDA-MB415細胞、CoCL2細胞
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