"MFE-296 Adherent子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MFE-296 Adherent子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
BE2-M17細胞系相關產(chǎn)品：COLO680N細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞、SW1222細胞
SUDHL8細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
Kasumi-6細胞系相關產(chǎn)品：WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
L132細胞系相關產(chǎn)品：SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞
L5178YR細胞系相關產(chǎn)品：D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞
HCC78細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
細胞生長特性：貼壁生長
MFE-296 Adherent子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
KOPN-8細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
MDA-MB-231細胞系相關產(chǎn)品：KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞
NCI-H295R細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞
NCI-H1341細胞系相關產(chǎn)品：SNU-407細胞、Case 3細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞
H2081細胞系相關產(chǎn)品：hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
HT 144細胞系相關產(chǎn)品：CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞
NCI-H211細胞系相關產(chǎn)品：H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
SW403細胞系相關產(chǎn)品：V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞
HO-1-N-1細胞系相關產(chǎn)品：PGLH7細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、HUSMC細胞
NCI-446細胞系相關產(chǎn)品：RM1細胞、H1522細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞
MDAMB468細胞系相關產(chǎn)品：HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞
HT細胞系相關產(chǎn)品：WM35細胞、MIHA細胞、SNU1細胞
DV-90細胞系相關產(chǎn)品：Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞
MFE-296 Adherent子宮內(nèi)膜癌細胞系
HuT102細胞系相關產(chǎn)品：PLA-801D細胞、RPMI-8226細胞、NCl-H157細胞
BMSCs（mBMSCs）細胞系相關產(chǎn)品：U-2OS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞
P3J HR1-K細胞系相關產(chǎn)品：A-101D細胞、HCC1008細胞、NCIH1563細胞
RGE細胞系相關產(chǎn)品：Hs 683.T細胞、L615細胞、NOZC-1細胞
NCI-H1975細胞系相關產(chǎn)品：LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關產(chǎn)品：95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞
NCI-HUT-292細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
LS 513細胞系相關產(chǎn)品：H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關產(chǎn)品：TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞
C12細胞系相關產(chǎn)品：DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
HLE-B3細胞系相關產(chǎn)品：2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞
OCI-AML3細胞系相關產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
SKNF1細胞系相關產(chǎn)品：HAC-84細胞、SNU638細胞、AtT-20細胞
SW954細胞系相關產(chǎn)品：KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞
L-cell細胞系相關產(chǎn)品：MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
H719細胞系相關產(chǎn)品：CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞
HONE-1細胞系相關產(chǎn)品：PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
J-774A.1細胞系相關產(chǎn)品：CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞
AC29細胞系相關產(chǎn)品：HEC-1-B細胞、H8細胞、GM3190細胞
SEM細胞系相關產(chǎn)品：LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
SNU-869細胞系相關產(chǎn)品：P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞
HCT116細胞系相關產(chǎn)品：Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞
Kit 225細胞系相關產(chǎn)品：NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
Hs-940細胞系相關產(chǎn)品：UCLA RO-81-A-1細胞、SK-Hep1細胞、751-NA-15細胞
SKNAS細胞系相關產(chǎn)品：SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
Hs-695-T細胞系相關產(chǎn)品：H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞
rRTEC細胞系相關產(chǎn)品：H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關產(chǎn)品：Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
BIC1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
HN 4細胞系相關產(chǎn)品：NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞
EoL-1 cell細胞系相關產(chǎn)品：Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
PBMC細胞系相關產(chǎn)品：kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞
WSU-DLCL-2細胞系相關產(chǎn)品：UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞
SKCO1細胞系相關產(chǎn)品：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
PLC8024細胞系相關產(chǎn)品：LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞
CV-1細胞系相關產(chǎn)品：CCD 1112SK細胞、HCPEpiC細胞、WiDrTC細胞
HemECs細胞系相關產(chǎn)品：Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞
HUTU80細胞系相關產(chǎn)品：SK-LMS-1細胞、IPECJ2細胞、PCI-SG231細胞
SU-DHL-2細胞系相關產(chǎn)品：KTA7細胞、KOSC-2 cl3-43細胞、Rainbow Trout Embryo細胞
MDA2B細胞系相關產(chǎn)品：WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
SACCLM細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞
HTR8/SVneo細胞系相關產(chǎn)品：COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞
MFE-296 Adherent子宮內(nèi)膜癌細胞系
U-251 MG細胞系相關產(chǎn)品：AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞
TGBC-11-TKB細胞系相關產(chǎn)品：RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞
Tu-686細胞系相關產(chǎn)品：HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞
MC3T3E1細胞系相關產(chǎn)品：Panc10.05細胞、RH7777細胞、UT7細胞
Cor L51細胞系相關產(chǎn)品：NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞
SF295細胞系相關產(chǎn)品：H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
Rat Lung-65細胞系相關產(chǎn)品：M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
MSTO211H細胞系相關產(chǎn)品：NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
MAVER細胞系相關產(chǎn)品：HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
WC00097細胞系相關產(chǎn)品：HCC0202細胞、BL2141細胞、NCI-H1688細胞
HUT28細胞系相關產(chǎn)品：COLO 320 HSR細胞、KPL1細胞、SK-RC 39細胞
NCI-H295R細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-8細胞、Wistar Institute-38細胞、EJ-1細胞
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