"MFE-296 epithelioid cells子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類(lèi)脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。 OCI-AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320DM細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞、HNE1細(xì)胞 B 95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-4細(xì)胞、HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞 NT2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞、D10細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 MFE-296 epithelioid cells子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái),很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來(lái)也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò),細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 Hs 766細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52PE細(xì)胞、A172細(xì)胞、HF-91細(xì)胞 KYSE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1573細(xì)胞、BJ1細(xì)胞、H1299細(xì)胞 Hs 863.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-Lec1細(xì)胞、A431細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞 MEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 111細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞 NCIH2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:74Int細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 MFE-296 epithelioid cells子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過(guò)程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過(guò)高或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來(lái)表示單位。 Namalva細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nakata-1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞 D283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JB-V細(xì)胞、L 428細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞 H-2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3細(xì)胞、A549細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞 KU19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPa2細(xì)胞、GalK1細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞 MIA-PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞 J-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR 90細(xì)胞、A9細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞 M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞 KU-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC14細(xì)胞、2008細(xì)胞、NKT細(xì)胞 CAL 120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1.K細(xì)胞、D562細(xì)胞、MRC9細(xì)胞 OE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞 MFE-296 epithelioid cells子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 MBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞 NCI N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC-803細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞 Vero 76 clone E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO 27細(xì)胞、HMCB細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞 KG-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HVSMC細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞、QG-56細(xì)胞 PTK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞 H-650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞 U 266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-4細(xì)胞、AML-EOL-1細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞 MiaPaca.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細(xì)胞、L-428細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞 U-343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-601細(xì)胞、SW480E細(xì)胞、DB細(xì)胞 OVCA420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H 9細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞 ME180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1-a細(xì)胞、L78細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞 Hs 578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1171細(xì)胞、Tu686細(xì)胞、J82細(xì)胞 NTERA2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11TKB細(xì)胞、H378細(xì)胞、BT-549細(xì)胞 MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ketr-3細(xì)胞、HAPI細(xì)胞、C-6細(xì)胞 KASUMI6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1435細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞、RMG1細(xì)胞 GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞 LICR-LON-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-38細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞、H2023細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞、EBC1細(xì)胞 U-2 OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-0細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞、MMQ細(xì)胞 E.L.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL9217細(xì)胞、HEL299細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞 HEK-AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI1細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞 HNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞、NCI-SNU-119細(xì)胞 GM03671C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-28細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞 MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞 CaES-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA453細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞、H211細(xì)胞 Ej138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi5細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、G422細(xì)胞 HL-60 clone15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLOY4細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞 HIT clone T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞 LS-513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞 CORL105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞 SCCVII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG ATCC細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、SiHa細(xì)胞 PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞 MOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞 C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLM8細(xì)胞、TE13細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞 KYSE0520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-1細(xì)胞、RM-1細(xì)胞、S16細(xì)胞 CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞 NT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH.a細(xì)胞、CT 26細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞 U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞 MKN-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS 1598細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞 Hs 870.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPVSMC細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞 Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 205細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞 EC-GI-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-180細(xì)胞、NOR10細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞 SNU182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞 BAC1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD-2細(xì)胞、HBVP細(xì)胞、VB細(xì)胞 639V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695T細(xì)胞、OPM2細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞 T8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞、RCC23細(xì)胞 E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞 NCIH1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888Lu細(xì)胞、LLC1細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞 HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞 NUGC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞 G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞 MFE-296 epithelioid cells子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 NCI-H2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1651細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞、H-441細(xì)胞 293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-3573細(xì)胞、NCIH929細(xì)胞、MB49細(xì)胞 BHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEC細(xì)胞、HS-695T細(xì)胞、SF295細(xì)胞 H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2-Luc細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞 "
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