"L6 Adherent大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞是Yaffe在甲基膽蒽存在的情況下從大鼠大腿肌原代培養(yǎng)的最初兩代細(xì)胞中分離得到的；在培養(yǎng)基中融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維，細(xì)胞融合的程度隨著代數(shù)的增加而下降，因此細(xì)胞應(yīng)低代次冷凍并周期性地重新克隆以選擇融合能力強(qiáng)的細(xì)胞。鼠痘病毒陰性。該細(xì)胞應(yīng)在達(dá)匯合狀態(tài)前傳代，以延緩細(xì)胞分化能力的喪失。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
L6 Adherent大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽(tīng)說(shuō)，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近３００株細(xì)胞里面，還沒(méi)遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒(méi)養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
EFM-192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H524細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞
HT115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-5細(xì)胞、SNU5細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞
SNK6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B1細(xì)胞、H69C細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
KU 812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226S細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞
NCIH378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320-DM細(xì)胞、COS-7細(xì)胞、EC9706細(xì)胞
UPCI:SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
L6 Adherent大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：成肌細(xì)胞樣
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無(wú)菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過(guò)濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過(guò)程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
CCD-18Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW 01細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞、A2780 CP70細(xì)胞
HEK293-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC154細(xì)胞、H-2170細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞
RPMI-8226S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCSMC細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞、HT115細(xì)胞
DoTc2-4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞、SG231細(xì)胞
LUDLU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY3細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞、K562細(xì)胞
SK-ES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-5細(xì)胞、PSN1細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞
GM03573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、GM03320細(xì)胞、H-2141細(xì)胞
Mink Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1915細(xì)胞、HCC-44細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666_DA細(xì)胞、526mel細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞
COLO 394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRPEpiC細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞
IBRS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoTc2-4510細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞、SW780細(xì)胞
OCM1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：686LN-M4e細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞
H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_04_03細(xì)胞、ME180細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞
L6 Adherent大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞系
HSC-T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞
28SC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-ESF-1細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞、COLO201細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-869細(xì)胞、SK-Col-1細(xì)胞、D341細(xì)胞
MA-c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69/P細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞
RBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBVEC細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞、GM00215細(xì)胞
NB19-RIKEN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MODE-K細(xì)胞、NCI-H2342細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞
CAL12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細(xì)胞、SEG1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞
HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞
Vx2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：697細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞
UCH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10RGB細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞、H1944細(xì)胞
CCD-112 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：266 Bl細(xì)胞、H211細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞
T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bowes melanoma cells細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞、GP2d細(xì)胞
HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293F細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞、SNU638細(xì)胞
SU-DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr-TC細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞
2PK-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-3-VGH細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞
Alexander cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 c18細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞
UCLA-SO-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H650細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞、H-711細(xì)胞
SW-480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H78細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞
RGC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F0細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、A 72細(xì)胞
HuTu 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT483細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3M細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞、MLM細(xì)胞
HGMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 296細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 540細(xì)胞、RMC細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞
HCC1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、NL-20細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞
IGROV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H226細(xì)胞、GH3細(xì)胞、SW982細(xì)胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL4細(xì)胞、HT細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞
SU8686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL3A細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞
NuTu-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B15細(xì)胞、WI 38細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞
VM-CUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞
NCI-H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞
TE-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS-3細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞
U87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-19細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞
Plaepi 34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA PCa 2b細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞、CA922細(xì)胞
PG-4 S+L-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLMVEC細(xì)胞、SW-780細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞
HAC-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-3_27細(xì)胞、KNS62細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞
SV-HUC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro 2a細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM19細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞、U937細(xì)胞
P3X63Ag8653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A704細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞
T/G HA VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：10T1/2細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、HARAB細(xì)胞
SW-837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR-1細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞
COC1/CDDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81A-1細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
L6 Adherent大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞系
NHDF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 33細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 134VI細(xì)胞、HOS細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞
OCI-AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JURKAT E-6.1細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞、GM07404A細(xì)胞
KNS-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388D1細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞、T47-D細(xì)胞
H1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-250細(xì)胞、211H細(xì)胞、BE2C細(xì)胞
Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：My-La 2059細(xì)胞、NKL細(xì)胞、NKL細(xì)胞
769P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH1細(xì)胞、AU-565細(xì)胞、H-1770細(xì)胞
0V-1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780S細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞、JB 6細(xì)胞
EC-GI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-3細(xì)胞、PK13細(xì)胞、293-GP細(xì)胞
CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞
CAL-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1435細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞、RPMI 1788細(xì)胞
RPMI-8226S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCSMC細(xì)胞、ECC10細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞
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