"MDA-MB-468 Adherent人乳腺癌細胞系
細胞背景資料:該細胞是1977年由CailleauR等從一位患有轉(zhuǎn)移性乳腺癌的51歲黑人女性的胸腔積液中分離得到的。雖然供體組織的G6PD等位基因雜合,但此細胞株始終表現(xiàn)為G6PDA表型。P53基因273位密碼子存在G→A突變,從而導(dǎo)致Arg→His替代。每個細胞上存在1×106個EGF受體。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
預(yù)防細胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MDA-MB-468 Adherent人乳腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié),這里說一些我個人的經(jīng)驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細胞,常用于做實驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點拙見,可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對細胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經(jīng)驗,也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng),尤其是細胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗,就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結(jié)下來,細胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細胞來源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經(jīng)驗,而忽視試劑,溶液尤其是細胞的質(zhì)量,后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
TFK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
MILE SVEN 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;2-3天換液1次
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
OV-CA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞
HANK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞
細胞生長特性:貼壁生長
MDA-MB-468 Adherent人乳腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
VMRC-LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞
LAN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞
SK-N-BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞
A549/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞
U-251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
COLO320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞
SW 756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
IM 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞
BGC823細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
U-937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞
V 79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
HFLS-RA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞
MDA-MB-468 Adherent人乳腺癌細胞系
16HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞
R-1059-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞
HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞
118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞
D-341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
MDA1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞
UPCI-SCC-154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞
COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
NK92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞
Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
HAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞
Pa17C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-345細胞、2B4-L細胞、HT 1197.T細胞
Jijoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
PNT1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-1細胞、HCCLM6細胞、HLEC-SRA 01/04細胞
SKml2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞
NCI-H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞
TE-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞
ZR751細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞
SNU182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
WM115F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞
HPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞
NCI-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞
V79-GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞
P3X63Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞
HEK293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
PSN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ1細胞、NB-19細胞、293E細胞
NCI-H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞
TE 85.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
NCI.H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
LNCaP FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞
U-343 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞
hTERT-HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞
BTI-Tn-5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞
HO-8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
P3J HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞
MADISON LUNG TA-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
H-1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-3細胞、MLMEC細胞、CPA47細胞
MDA-MB-468 Adherent人乳腺癌細胞系
CMT 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞
L-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L02細胞、ATN-1細胞、HOS-143B細胞
QBI-293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞
TE32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞
LL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
MDA-MB-435S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs_578t細胞、EoL-1 cell細胞、G402細胞
A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞
Caco 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM-L細胞、hSCC-25細胞、FRO細胞
NPA 87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞
EBTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE2細胞、U-251MG細胞、RBL.2H3細胞
SF-539 BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL1細胞、IMCD3細胞、HEI-193細胞
SK-N-BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB468細胞、HL60細胞、HCC-1187細胞
"