"MDA-MB-468 Cell:人乳腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:該細胞是1977年由CailleauR等從一位患有轉(zhuǎn)移性乳腺癌的51歲黑人女性的胸腔積液中分離得到的。雖然供體組織的G6PD等位基因雜合,但此細胞株始終表現(xiàn)為G6PDA表型。P53基因273位密碼子存在G→A突變,從而導(dǎo)致Arg→His替代。每個細胞上存在1×106個EGF受體。 JB6 [Mouse]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞 SUSM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞 SuDHL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞 CCRF-CEM/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 MDA-MB-468 Cell:人乳腺癌細胞系 細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;2-3天換液1次 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 OVCA432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 19-19細胞、REC-1細胞、H-838細胞 MHCC97L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞 CW2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-2細胞、MJ細胞、HS 683T細胞 SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞 NB9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM451細胞、A-9細胞、MPC11細胞 細胞生長特性:貼壁生長 MDA-MB-468 Cell:人乳腺癌細胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! 細胞形態(tài)特性:上皮樣 SW-982細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞 Baby Hamster Kidney 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞 SN12C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H727細胞、D283-MED細胞、TJ905細胞 HSC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞 Hs839T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG ATCC細胞、PANC0203細胞、SK-Hep1細胞 MDA-kb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-699細胞、ketr 3細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞 SKMEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞 MDA-MB-468 Cell:人乳腺癌細胞系 LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞 N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞 HeLa/S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、NCTC1469細胞、GP-293細胞 KS-SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞 HT(H9)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞 NCI-H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A3細胞、Strain V細胞、B16細胞 Hs695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Basophilic Leukemia-1細胞、COLO320/DM細胞、SUPM2細胞 MFHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal fibroblast-10細胞、KLN205細胞、H-2198細胞 DMS-53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞 NALM-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞 HeLa229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM-1細胞、CA-46細胞、OCI-Ly 7細胞 293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞 OCI Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞 A9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1688細胞、H-1573細胞、A-10細胞 NW-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag1.2.3細胞、BEAS-2B細胞、Mevo細胞 RS4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞 C8-D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞 CAL-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-Bladder-V細胞、T-47-D細胞、COLO680N細胞 CCD966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞 NCI-H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞 OCM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞 SW 1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞 HGF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAN 02細胞、SNU-869細胞、JIMT-1細胞 MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞 U266BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞 P3X63Ag8653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞 MV 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB361細胞、UCLA SO M21細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞 SKNBE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb 1細胞、HCC-1588細胞、NBL_S細胞 Saos2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞 SU-DHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTA7細胞、KOSC-2 cl3-43細胞、Rainbow Trout Embryo細胞 SU-DHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞 MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞 A-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞 Hs 742.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞 639V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞 EOL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞 SU-DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CII細胞、HMrSV5細胞、MCA38細胞 RBL.2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞 SU-DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞 Tb1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞 HTR8svn細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞 CRFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞 OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞 MDA-MB-468 Cell:人乳腺癌細胞系 OAW-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞 BEP2D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞 H3255_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞 H2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT-5A細胞、OEC19細胞、hTERTHME1細胞 P-815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞 NIH 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞 TF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞 Chang Cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞 639V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞 H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞 QBC939細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA-19細胞、TE9細胞、C518細胞 Hs-578-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2196細胞、SNU-398細胞、Walker-256細胞 "
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