"32Dcl3 Lymphoblastoid cells小鼠骨髓淋巴母細胞系
細胞背景資料:骨髓淋巴瘤;C3H/HeJ
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
MF2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
NCM460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞
PBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
細胞生長:懸浮
32Dcl3 Lymphoblastoid cells小鼠骨髓淋巴母細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
CCD-1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞
MRAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2B細胞、LS-123細胞、RAMSCs細胞
Farage OL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-36P細胞、SK-RC 52細胞、SK-MEL5細胞
Kit-225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE8.1/2細胞
WM-266-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
32Dcl3 Lymphoblastoid cells小鼠骨髓淋巴母細胞系
細胞生長特性:懸浮
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
U20S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP-293細胞、HNE-1細胞、GA-10(Clone 4)細胞
Fetal Human Lens-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd.3[BEND3]細胞、A375-S2細胞、A-431細胞
AU-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
IOSE80UBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞
MODE-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞
ONS76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
NCI-H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞
A2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞
P3J HR1-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-101D細胞、HCC1008細胞、NCIH1563細胞
Detroit 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞
32Dcl3 Lymphoblastoid cells小鼠骨髓淋巴母細胞系
RTMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
SUM 102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞
NCTC-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞
T_T_細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞
QG56細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞
HEP3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
HEP3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
alpha TC1.6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞
J-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞
MV4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、LICR-HN6細胞、PA1細胞
JG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞
NCI-H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞
NRK clone 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞
KBM7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞
K1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞
HS-940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞
KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞
TGW-I-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞
HHUA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266BL細胞、Hs-578Bst細胞、NK92-MI細胞
OE33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMC細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、SK Hep1細胞
Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
G401細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞
NCIH810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2126細胞、NFHIOSE-29細胞、LS513細胞
GM17346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞
293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
TE7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
QGP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞
GLC-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞
MDAMB453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-436細胞、H-1651細胞、SK-ML2細胞
52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞
2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞
SKG-IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
Nb2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞
TF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞
KYSE-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞
EJ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Functional Liver Cell-7細胞、FHCRC subclone 11細胞、Cor L88細胞
H341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
Daoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB-17細胞、UMRC-2細胞、Rat-2細胞
BEAS 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
DC 2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞
Sp2/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞
U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
MM1.S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB1細胞、LM8細胞、V-79細胞
GM03320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞
BEP2D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞
WEHI 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
COV 504細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞
32Dcl3 Lymphoblastoid cells小鼠骨髓淋巴母細胞系
JIMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞
THP 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-226細胞、Rat-1細胞、NW-MEL-38細胞
WPMY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TJ905細胞、BEAS2B細胞、EBC-1細胞
AU-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS45-1細胞、RMS13細胞、FL62891細胞
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