"32Dcl3 Cell:小鼠骨髓淋巴母細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:骨髓淋巴瘤;C3H/HeJ
HIT clone T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞
NCI-H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞
Jurkat E6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
U373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
32Dcl3 Cell:小鼠骨髓淋巴母細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
U-CH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞
CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞
IPI-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞
EA.hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAMSCs細胞、SKMel-5細胞、HEI-193細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
細胞生長特性:懸浮
32Dcl3 Cell:小鼠骨髓淋巴母細胞系
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-1細胞、U20-S細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞
aTC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞
HPAF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
HT115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
Hs839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞
EFM192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞
32Dcl3 Cell:小鼠骨髓淋巴母細胞系
COLO-320-DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GEO細胞、KYSE-520細胞、SW1353細胞
H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1143細胞、Pa14C細胞、OCI-Ly19細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞
PL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
ABE8.1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞
DU4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP細胞、MT-4細胞、KTC1細胞
A10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞
RenCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞
RenCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞
DU 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞
SK-MES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞
MZ-CRC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞
Hep G2-Luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
HEC1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞
RCC23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞
CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
KCL22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞
MEL-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞
NP-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4-II-E細胞、Huh7.5細胞、NCIH1105細胞
BALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞
IBMF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞
Colo-201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞
KYSE-150細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B細胞、74Int細胞、Ly1細胞
BERH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1-S細胞、HL-7702細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞
Merwin Plasma Cell tumor-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞
SUM-52-PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 175 VII細胞、HN13細胞、HuH1細胞
CCC-HEH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞
SW 780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞
87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
RPPVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞
H-1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞
Panc4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞
Hep 3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT-1細胞、CCD-841-CoN細胞、769-P細胞
NCI-H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433細胞、MES-SA Dx5細胞、OsACL細胞
PCI-04B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞
L 132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、MES-13細胞、H1694細胞
DU-4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1359細胞、CCD 841 CoTr細胞、HSKMC細胞
293c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞
H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
G 292 Clone A 141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HEECs細胞、COV504細胞、X63-AG 8.653細胞
TALL-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞
32Dcl3 Cell:小鼠骨髓淋巴母細胞系
HCC1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞
SK-ChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞
U266B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞
IM-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW948細胞、CPA47細胞、NCL-H548細胞
D283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞
GP2d細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞
WIL2-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞
HCC-2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT RPE-1細胞、SU-DHL-8細胞、KYSE140細胞
2E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
N1S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞
TC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMBC細胞、WRL 68細胞、M14細胞
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