"ATN-1 Lymphoblastoid cells人T細(xì)胞白血病細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣 細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)菌操作步驟和注意事項(xiàng):1.打開(kāi)無(wú)菌工作臺(tái)及凈化室的紫外燈,消毒半小時(shí)以上。2.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈,打開(kāi)超凈臺(tái)風(fēng)機(jī),等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風(fēng)淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點(diǎn)燃酒精燈;超凈臺(tái)內(nèi)應(yīng)避免放入過(guò)多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開(kāi)各類瓶蓋前先過(guò)火,以固定灰塵;打開(kāi)的瓶口、試管口過(guò)火焰,鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。8.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺(tái),應(yīng)使瓶口斜置,應(yīng)盡量避免瓶口敞開(kāi)直立。9.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個(gè)不同的細(xì)胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開(kāi)培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺(tái)上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復(fù)工作臺(tái)面。 NCI-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu 212細(xì)胞、SUD4細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞 IB-RS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1417細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞 Hs 343.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TN5B14細(xì)胞、HKC細(xì)胞、V79-1細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮 ATN-1 Lymphoblastoid cells人T細(xì)胞白血病細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái),很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來(lái)也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò),細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CC-LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2279細(xì)胞、TE-11細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞 HOS-TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkMel31細(xì)胞、MS1細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞 BIU-87/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 432細(xì)胞、PF-382細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞 H184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:28SC細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞 OCI Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1437細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 ATN-1 Lymphoblastoid cells人T細(xì)胞白血病細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開(kāi)蓋子,用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。【溫馨提醒】1)從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存,但為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí),要做好防護(hù)工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時(shí)候,有些初次實(shí)驗(yàn)員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時(shí)候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺(tái)中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預(yù)熱過(guò)的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。 Vero-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-513細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞、PSN1細(xì)胞 H-1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞、AML-193細(xì)胞 BSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta-519細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、H69/P細(xì)胞 SU8686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL3A細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞 SNU1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞 NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞 NCI-H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-647細(xì)胞、RBL細(xì)胞、RKO細(xì)胞 HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞 IHH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS5細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞 SCL II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBRS-2細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞、J774.A1細(xì)胞 ATN-1 Lymphoblastoid cells人T細(xì)胞白血病細(xì)胞系 B16BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI193細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、MSF細(xì)胞 SCaBER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細(xì)胞、RGC6細(xì)胞、L 428細(xì)胞 UCLA NPA871細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB106細(xì)胞、A2780 CP70細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞 X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MX1細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞、H-1581細(xì)胞 NCI-H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞 NCIH1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1498細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞、ES2細(xì)胞 CL1.0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞 PCI-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM-1細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞、HUT125細(xì)胞 University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 375細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞 HEK293-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC154細(xì)胞、H-2170細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞 MARC-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞 SK-MES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G519細(xì)胞、MCF7-CTRL細(xì)胞、MB468細(xì)胞 HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞 SUNE 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞 RPMI no. 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT-101細(xì)胞、G292細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞 KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞 NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞 L5178-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-299細(xì)胞、GM3190細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞 LC-1/sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 10.05細(xì)胞、Scott細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞 CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM-2細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞、KMB17細(xì)胞 H-220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞、PK 15細(xì)胞 Pa017C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA802細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞、Li-7細(xì)胞 TEV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞 MKN 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCAEC細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞 Panc203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCH細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞、Human podocyte細(xì)胞 LM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV 304細(xì)胞、PK-13細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞 H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 299細(xì)胞、87MG細(xì)胞、MA 104細(xì)胞 BIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞 SUNE 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞 SKOV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 3細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞、G-292細(xì)胞 H-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV522細(xì)胞、EOC20細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞 LoMeT-ccRcc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMCs細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞 OAW42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC細(xì)胞、M210B4細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞 Jurkat-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞 H-2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL85-1細(xì)胞、PA-1細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞 DAKIKI Clone 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-431細(xì)胞、766T細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞 RL95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 166細(xì)胞、GM03570細(xì)胞、Molm 13細(xì)胞 OCI-Ly 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-HEP-1細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、J 82細(xì)胞 Y3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM3細(xì)胞、DiFi細(xì)胞、DHL8細(xì)胞 NFHIOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞 SK-NMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T6細(xì)胞、PAI細(xì)胞、MAEC細(xì)胞 GM05372E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU423細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞 LOU-NH-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/AdrR細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞 KP-N-NS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV 1細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞 SK-N-DZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-1847細(xì)胞、EC109細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞 QGP 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞 P3/X63/Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1666細(xì)胞、HFSF細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞 H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞 DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞 CAL78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-296細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞、OEC19細(xì)胞 SW-480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H78細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞 ATN-1 Lymphoblastoid cells人T細(xì)胞白血病細(xì)胞系 OE-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC1細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞 LU451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82 COT細(xì)胞、32D.3細(xì)胞、JC細(xì)胞 293c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH23細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞、A427細(xì)胞 BSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta-519細(xì)胞、EU-2細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞 "
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