"KG-1 Lymphoblastoid cells急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 CEM-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 468細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞 NuTu-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B15細(xì)胞、WI 38細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞 OVCAR-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞 細(xì)胞生長:懸浮 KG-1 Lymphoblastoid cells急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細(xì)胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:3傳代,2-3天傳一代 NCIH2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL-22細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞 PG-BE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1792細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞、H510A細(xì)胞 NCI-SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞、GL261細(xì)胞 SHG 44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD-LM-2細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞 TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-1155細(xì)胞、H-2052細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 KG-1 Lymphoblastoid cells急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:懸浮生長 細(xì)胞形態(tài)特性:原粒細(xì)胞 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 Melanoma 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T. T細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞 MDAPC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M07e細(xì)胞、H2106細(xì)胞、SF539細(xì)胞 52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc04.03細(xì)胞、BT-20細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞 B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞 Hs821T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATC241細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞 NCI-H1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC-6細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞、RPE1細(xì)胞 PATU-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHZ-88細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞、SW620細(xì)胞 TE-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4:11細(xì)胞、CHOS細(xì)胞、NCI-H820細(xì)胞 PCI-4M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT RPE1細(xì)胞、52PE細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞 Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAOEC細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞 KG-1 Lymphoblastoid cells急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系 KPNRTBM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone3細(xì)胞、H 9細(xì)胞、CP-70細(xì)胞 LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞 HeLa S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H82細(xì)胞、H676B細(xì)胞、Mink細(xì)胞 Nb2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM clone 7細(xì)胞、PIGI細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞 5637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2T細(xì)胞、H292細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞 P3 NS1 Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 706.T細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞 P3 NS1 Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 706.T細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞 HHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 5細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞、LAD2細(xì)胞 HS766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL(2)細(xì)胞、HMO6細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞 BJA-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3Ag1.2.3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞、BC-020細(xì)胞 EBNA293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-I細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞 IM95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL279細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞 BEAS 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞 H-2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Soleus clone 8細(xì)胞、RL-952細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞 NCIH1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H23細(xì)胞、AGS細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞 NG10815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHK細(xì)胞、B78細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞 58F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL2細(xì)胞、H1395細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞 H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:22Rv-1細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞 LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞 WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞 P3-X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-11細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞 HT 1197.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBSMC細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞 Hs294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞 QBC939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA-19細(xì)胞、TE9細(xì)胞、C518細(xì)胞 H184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:28SC細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞 mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/CAR細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞、HuH6細(xì)胞 33604細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-18細(xì)胞、H-711細(xì)胞、U118細(xì)胞 SKO3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143 B細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞 HL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM-3細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞 L cells (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 422細(xì)胞、H1882細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞 Ramos(RA1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC-J2細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞 SUIT 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADR細(xì)胞、P-3J細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞 KYSE270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780CP細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞 C-4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞 HPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FF-WT-BJ細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞、RFL6細(xì)胞 NCI-H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞 AMJ2C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 2細(xì)胞、BE2C細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞 OCI-Ly 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32Dc3細(xì)胞、LA 4細(xì)胞、SR-786細(xì)胞 UMNSAH/DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM-460細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞、H-1993細(xì)胞 BALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien 133細(xì)胞、HEH2細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞 BIU87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2591細(xì)胞、NCI-H358細(xì)胞、HSAEC1-KT細(xì)胞 HEK293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞 Z138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H520細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞 Madison 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL2141細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞、H510細(xì)胞 SkMel31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R-V1細(xì)胞、LS-174細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞 ARPE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞、U 937細(xì)胞、IM 9細(xì)胞 MDAMB330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞 LS174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung-65細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞 KP-N-RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細(xì)胞、KAT5細(xì)胞、578T細(xì)胞 RIN-m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞 COS7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、HR1K細(xì)胞、Vx2細(xì)胞 KG-1 Lymphoblastoid cells急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系 Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-548細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞 CFSC-2G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2405細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞、TE-7細(xì)胞 Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251細(xì)胞、H810細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞 52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc04.03細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞、BHP 10-3細(xì)胞 "
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