"2BS fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
細胞背景資料：胚肺；成纖維細胞；女性
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
HOS(TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAVSMC細胞、NCI-841細胞、NCIH2347細胞
Clone Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
NIH:OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞
細胞生長：貼壁
2BS fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
253J B-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Cl #5細胞、HEC-1A細胞、H838細胞
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
COLO 680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞
SKCO 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE32細胞、JJN3細胞、MDA-MB 231細胞
KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
2BS fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
HCC78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
NTera 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞
alphaTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞
W256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞
EFO 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
Sol8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW2647細胞、Oregon J-111細胞、U-118MG細胞
NCIH1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
IMR32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
Ra #1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-10細胞、MDAMB157細胞、H-1781細胞
2BS fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
P-2003細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 15細胞、TYK-nu細胞、HSAS4細胞
Alexander cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞
H-1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞
HCC-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞
SNU-638細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞
SUDHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞
PLC PRF 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞
LAPC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
SK-ChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞
2780CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
MT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
CCD841CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 14細胞、Hep2細胞、Hs742T細胞
22Rv-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞
SUM 190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC-1細胞、SH-SY5Y Parental細胞、HPAF-II/CD18細胞
Hx147細胞系相關(guān)產(chǎn)品：343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞
NCIH661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞
MLA 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞
Panc-05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1353細胞、WEHI164細胞、EVSA/T細胞
PTK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052細胞、CFPAC細胞、MuM-2B細胞
T-HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞
PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞
JROECL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
COV362細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
VMM39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞
HPAF-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
MOLT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME-1細胞、VeroE6細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞
Rin-M-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T3細胞、HCC-1806細胞、EOC-20細胞
GA-10 clone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞
C-4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞
MV522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞
VP229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞
HLE-SRA-01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞
OV-CA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
COLO-320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞
CORL88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
Hk-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
CTV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/Ag4-1細胞、T-98G細胞、FLS細胞
RCC23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞
GLAG-66細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 13細胞、RPMI7666細胞、SV-HUC-1細胞
JROECL 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞
HOS TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone M-3細胞、MDA-1386細胞、Pro-Lec1.3C細胞
SKNO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞
B16-F10--RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3(A31)細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、HO-8910PM細胞
DMS-273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840_T細胞、2780細胞、201T細胞
HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞
HFLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞
LS180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW982細胞、MDA-MB453細胞、Hs 294T細胞
2BS fibroblast cells人胚肺成纖維細胞系
T47D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR-42J細胞、Hs895T細胞、Hs888T細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNFI細胞、NCL-H548細胞、PNT1A細胞
HOCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2-DAP細胞、NCIH2196細胞、F-36P細胞
NTera 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E115細胞、HCC2279細胞、SW-900細胞
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