"HES [Human embryonic skin fibroblast] fibroblast cells人皮膚成纖維細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:皮膚;成纖維細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類(lèi)脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。 COLO 320F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-402細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞 RPMI8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33 A細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞 NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 HES [Human embryonic skin fibroblast] fibroblast cells人皮膚成纖維細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開(kāi)始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫(xiě)傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Porcine Kidney-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801C細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞 HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc2_03細(xì)胞、SK-N-SH細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞 UMNSAH/DF#1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149細(xì)胞、HELF細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞 Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac 6細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞、LN-229細(xì)胞 KG1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-26細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 HES [Human embryonic skin fibroblast] fibroblast cells人皮膚成纖維細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過(guò)程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過(guò)高或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來(lái)表示單位。 P560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-78細(xì)胞、H889細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞 EOC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)n細(xì)胞、HRMC細(xì)胞、CORL23細(xì)胞 HCC0015細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV434細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞 MADISON LUNG TA-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK136細(xì)胞、MIA PaCa-2細(xì)胞、C666-1細(xì)胞 RASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly8細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞 RPMI 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63.Ag8.653細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞 Hs 343.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TN5B14細(xì)胞、HKC細(xì)胞、V79-1細(xì)胞 CTSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞 CAL 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞 MDA-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A-1細(xì)胞、H87細(xì)胞、10RGB細(xì)胞 HES [Human embryonic skin fibroblast] fibroblast cells人皮膚成纖維細(xì)胞系 CTLL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M14細(xì)胞、CemT4細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞 MARC 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL2細(xì)胞、CP70細(xì)胞、T-T細(xì)胞 KP-N-NS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV 1細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞 Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-212細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞、MDA330細(xì)胞 RS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞 Y3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞 Y3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞 Human Liver-7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JiyoyeP-2003細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞 CEM clone 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞、SW-620細(xì)胞 NIH/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPC2B細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞、MX-1細(xì)胞 MDA453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT-6細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞 CHP-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM-1細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞 HT 1197.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBSMC細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞 NCIH2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞 M-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW626細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞 WB F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HSC細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞 PK-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIGI細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞、GB1細(xì)胞 MiaPaca.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細(xì)胞、L-428細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞 NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞 Psi-2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC-E2G8細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞 H283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 Bl細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞 SW-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat FHCRC細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞 HSC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1105細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞、NSH細(xì)胞 PL45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1細(xì)胞、NHDF細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞 OC-3-VGH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-6細(xì)胞、PJ34細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞 J45.01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞 VERO C 1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD3細(xì)胞、FDCP-1細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞 NCIH209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-5細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞、VE細(xì)胞 BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2OS細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞 NCI-SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-02-03細(xì)胞、Madison細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞 T98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細(xì)胞、130T細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞 YD38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-J細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞、143B細(xì)胞 Calu 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-1-Lu細(xì)胞、SW780細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞 LIXC-002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B4G12細(xì)胞、MRC9細(xì)胞、M059J細(xì)胞 MDA134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 1細(xì)胞、H-1993細(xì)胞、MDCK細(xì)胞 GM03320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.OV.3細(xì)胞、675T細(xì)胞、L-02細(xì)胞 P3 88 D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞 Mel526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-MS細(xì)胞、KCL-22細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞 P3X63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞 C518細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞 MM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞、C3A細(xì)胞 Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞 MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞 HEP-3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2Z細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞 BEAS-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-1細(xì)胞、143TK-細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞 SW1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69細(xì)胞、SF539細(xì)胞、TE1細(xì)胞 Panc 2.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-1細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞 SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC1細(xì)胞、COR L279細(xì)胞、ES-2細(xì)胞 Walker 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞、GBC-SD細(xì)胞、BHP 10-3細(xì)胞 MDA-MB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK-21細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞 NS653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1869細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞 HES [Human embryonic skin fibroblast] fibroblast cells人皮膚成纖維細(xì)胞系 FM88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞、SKO007細(xì)胞 MIA Paca2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-28細(xì)胞、K-562細(xì)胞、BT.549細(xì)胞 RPMI 1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca Ski細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞、NKT細(xì)胞 HCC 94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624mel細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞 "
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