"NCI-H345 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞背景資料:小細胞肺癌;骨髓轉(zhuǎn)移;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞 Panc-813細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IA-LM細胞、PCI:SG-231細胞、OE-19細胞 Cloudman M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H345 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM1細胞、H1522細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞 SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞 PL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞 C-28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞 9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NCI-H345 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 32D:cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage OL細胞、LS174細胞、HepG2/C3A細胞 A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞 COV-362細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAEC細胞、MKN45細胞、PLB 985細胞 H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-1細胞、U20-S細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞 H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞 H1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA12細胞、SW900細胞、H283細胞 CAL120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR90細胞、OCILY-19細胞、RK-13細胞 MX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞 BetaTC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞 SUD6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞 NCI-H345 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 HTR8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞 OVCA5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞 MOLP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞 Granta519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞 253J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3569細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、RT4P細胞 BALB/3T3 (clone A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR5細胞、MUTZ3細胞、BNL CL2細胞 BALB/3T3 (clone A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR5細胞、MUTZ3細胞、BNL CL2細胞 ARPE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞 HDSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPsm細胞、MHH-CALL-2細胞、Kit 225-K6細胞 U-2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞 NCI-SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞 BxPC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7666細胞、M 1細胞、H-345細胞 EB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞 HR-8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞 FM88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞 AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-T細胞、MV4:11細胞、ID8/MOSEC細胞 MHCC-LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞 hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞 TGHAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞 McArdle RH-7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞 SJRH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞 NCI-H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞 Y3.AG.1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞 CCD-18Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW 01細胞、NCI-157細胞、A2780 CP70細胞 DLD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞 L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞 NCC-IT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2198細胞、MGHU1細胞、SUP-T1細胞 RMS13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞 MCF7-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞 VP229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞 HMO6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞 SW 579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞 U-87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞 ARIP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞 NCI H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞 GM3190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞 Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP 1細胞、IGR-OV1細胞、BHK-21細胞 Calu3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞 SW13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞 Medical Research Council cell strain-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞 NCI-H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞 143TK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)C細胞、SK Hep1細胞、WRL-68細胞 MCF-7/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞 NCI-H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞 USMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UT7細胞、Hs 840.T細胞、HEK-293-F細胞 OAW 42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞 BHK 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞 MCF 10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞 MDAMB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTCTL140細胞、SUM 149PT細胞、PC3-M細胞 OVCAR 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞 NCI-H345 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 WEHI 164 TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞 Jurkat-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney-21細胞、D283MED細胞、KPL-4細胞 HS766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL(2)細胞、HTori-3細胞、GM05887A細胞 COV-362細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAEC細胞、HT 1197細胞、P3X63 AG 8.653細胞 "
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