"NCI-H446 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞是１９８２年由CarneyD和GazdarAF等從一位小細(xì)胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細(xì)胞的原始形態(tài)并不具有小細(xì)胞肺癌特征。這個(gè)細(xì)胞株是小細(xì)胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種，表達(dá)神經(jīng)元特有的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶；左旋多巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達(dá)到可檢測(cè)水平。與正常細(xì)胞相比，該細(xì)胞c-mycDNA序列擴(kuò)增約２０倍，RNA增加１５倍。最初傳代培養(yǎng)基用含有５%FBS的RPMI１６４０，另外添加１０nM化可的松、０.００５mg/ml胰島素、０.０１mg/ml轉(zhuǎn)鐵
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
HuH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel526細(xì)胞、LC1細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞
KTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226細(xì)胞、UMC11細(xì)胞、A 375細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM19細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞、U937細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
NCI-H446 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異，有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買，培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過(guò)０~２０℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時(shí)，更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個(gè)，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G０點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
HS-294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-4細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞
JROECL19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1/Sq細(xì)胞、U118細(xì)胞、BT483細(xì)胞
Molm 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-O7e細(xì)胞、HCO細(xì)胞、38C-13細(xì)胞
RH-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2452細(xì)胞、Psi2-DAP細(xì)胞、H498細(xì)胞
MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H446 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁/懸浮生長(zhǎng)，混合
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞
GM03320D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK.10細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞、RH35細(xì)胞
L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞
H3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞
SCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 201細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞
C2C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC 316細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞
HREC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1672細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞、PLC-PRF-5細(xì)胞
EB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1783細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞
AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞
P36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGSMC細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞、NHDF細(xì)胞
NCI-H446 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
NCI-H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLMVEC細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞
Vero C1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206F細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞、TW01細(xì)胞
253J-BV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2/E6E7細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞
P3X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞
174xCEM.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H446細(xì)胞、GA10細(xì)胞、H-460細(xì)胞
PNT1-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL4細(xì)胞、GC-1細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞
7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4-1st細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞
SK-NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-362細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞、C4-1細(xì)胞
IMR 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞、H1048細(xì)胞
NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞
FAK+/+細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1869細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞
BEL 7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細(xì)胞、SW403細(xì)胞、NT-2細(xì)胞
MCA-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞
NCI-H526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞
COV504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H341細(xì)胞、Rh30細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞
H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGE細(xì)胞、3AA細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞
HR8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL10細(xì)胞、LS174T細(xì)胞、DMS153細(xì)胞
H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞
A2780/CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC-27細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞
293T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-64細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞、SMA560細(xì)胞
EJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL2細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞、SW-1463細(xì)胞
SW 1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2817細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞、MDA231細(xì)胞
ETCC007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞
OKAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR1細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、MC57細(xì)胞
HeLa S-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa 229細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞
MDCK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞
NCI-H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3-HeLa細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞
3LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-22細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞
HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞
Ej138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、G422細(xì)胞
IGR-OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1734細(xì)胞、EMT6細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞
MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞
RL95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 166細(xì)胞、GM03570細(xì)胞、Molm 13細(xì)胞
RBL-2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192B細(xì)胞、KB細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC2細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞
Walker/LLC-WRC256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1-E細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞
HT 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細(xì)胞、H2171細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞
WM 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-OV-1細(xì)胞、N-2a細(xì)胞、BT325細(xì)胞
Pro-5WgaRI3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞
B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUM2B細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞
KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL1細(xì)胞、H-2171細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞
MM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 4;11細(xì)胞、Tregs細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞
HBZY 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-MNNG細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞、REC1細(xì)胞
AN3 CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞
H-1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCO細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞、MCFs細(xì)胞
DMS 273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN-3細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞
NTERA-2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RM-1細(xì)胞、H-520細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞
Molm14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL78細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞
ATDC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST-6細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞
McCoy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1373細(xì)胞、HAVSMC細(xì)胞、CA-46細(xì)胞
Hmy.2 CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細(xì)胞、NE1細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞
NCI-H446 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
MM1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細(xì)胞、FAT細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞
A2780S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞、MAC1細(xì)胞
SW-837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR-1細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞
L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PMVEC細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞
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關(guān)鍵字： NCI-H446 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
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