"TJ905 epithelioid cells人膠質瘤細胞系 細胞背景資料:膠質瘤 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數活細胞數,用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 SW756細胞系相關產品:UCLA-SO-M14細胞、7860細胞、CAL120細胞 GC-2細胞系相關產品:OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞 RC-2細胞系相關產品:HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞 細胞生長:貼壁 TJ905 epithelioid cells人膠質瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CA922細胞系相關產品:MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞 R3/1細胞系相關產品:JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞 PC-9/GR細胞系相關產品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞 MC-4細胞系相關產品:SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞 M059K細胞系相關產品:NMCG1細胞、C-Lu65細胞、M07e細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 TJ905 epithelioid cells人膠質瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數據上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸的過程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現細胞數目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 A 549細胞系相關產品:HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞 HT 1197.T細胞系相關產品:RBSMC細胞、RMS 13細胞、KNS-42細胞 KYSE 270細胞系相關產品:HOP92細胞、Hs739T細胞、G-361細胞 LN-229細胞系相關產品:RGCs細胞、786-0細胞、hSCC-25細胞 NCI-H1105細胞系相關產品:NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞 MCF10-A細胞系相關產品:ME-1 [Human leukemia]細胞、SNU387細胞、SNU251細胞 LTEP-sm 1細胞系相關產品:Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞 NCIH128細胞系相關產品:MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、EBTr (NBL-4)細胞、G361mel細胞 HeLa229細胞系相關產品:RT-BM-1細胞、CA-46細胞、OCI-Ly 7細胞 KRC/Y細胞系相關產品:VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞 TJ905 epithelioid cells人膠質瘤細胞系 HSC/mHSC細胞系相關產品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞 STC-1細胞系相關產品:Tu-686細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞、NIH/3T3細胞 2B4-L細胞系相關產品:SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞 NCI-H1792細胞系相關產品:MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞 CCD966SK細胞系相關產品:KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞 OVCAR-8細胞系相關產品:578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞 OVCAR-8細胞系相關產品:578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞 COLO 206細胞系相關產品:H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞 DMS153細胞系相關產品:PL-9細胞、NCI-H1819細胞、SK-Mel1細胞 RAT2細胞系相關產品:Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞 C41細胞系相關產品:HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞 Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關產品:QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞 H-711細胞系相關產品:GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞 IPLB-SF-21-AE細胞系相關產品:SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞 SK-N-BE2細胞系相關產品:SNT8細胞、NCI-H676B細胞、SUM159細胞 J82COT細胞系相關產品:SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞 HEK 293-EBNA細胞系相關產品:HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞 BHK細胞系相關產品:TEC細胞、I90細胞、H2085細胞 Pt-K2細胞系相關產品:MDA 231-LM2-4175細胞、HFT-8810細胞、HKF細胞 HGBEC細胞系相關產品:BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞 SW403細胞系相關產品:V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞 OUMS23細胞系相關產品:LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞 H-2135細胞系相關產品:ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞 COV-362細胞系相關產品:BAEC細胞、MKN45細胞、PLB 985細胞 hTERT-RPE1細胞系相關產品:Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞 P3 NS1 Ag4細胞系相關產品:Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞 LIPF155C細胞系相關產品:DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞 PY8119細胞系相關產品:Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞 CHL-11細胞系相關產品:U373 MG細胞、Chang Cells細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞 DF-1細胞系相關產品:H1184細胞、UPCI:SCC090細胞、NCIH727細胞 AK細胞系相關產品:Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、HGMC細胞、TE-13細胞 JIMT1細胞系相關產品:SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞 HBdSMC細胞系相關產品:SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞 WM266mel細胞系相關產品:Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞 C8D1A細胞系相關產品:NCIH1930細胞、HELA-GFP細胞、Dunn LM8細胞 MDAMB361細胞系相關產品:HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞 H820細胞系相關產品:CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞 C3H10T1/2細胞系相關產品:NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞 H-2023細胞系相關產品:Kelly細胞、NCI-H102細胞、Reh細胞 COV434細胞系相關產品:SRS-82細胞、NWA細胞、FL83B細胞 KM12SM細胞系相關產品:OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞 SKCol1細胞系相關產品:AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞 RPMI-1846細胞系相關產品:Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞 MeT-5A細胞系相關產品:A-549細胞、SK-ES1細胞、PANC 327細胞 HCC2157細胞系相關產品:IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞 SU-DHL1細胞系相關產品:Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞 IOSE29細胞系相關產品:C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞 G-292, clone A141B1細胞系相關產品:Hs 766.T細胞、SCC-1395細胞、MT4細胞 OCI-LY-18細胞系相關產品:ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞 SKBR-3細胞系相關產品:RPMI 1846細胞、NCIH2085細胞、RT-BM-1細胞 Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞系相關產品:Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞 TJ905 epithelioid cells人膠質瘤細胞系 Kasumi 1細胞系相關產品:Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞 CTLA4 Ig-24細胞系相關產品:LC-1-sq細胞、EBC1細胞、KYSE510細胞 HEK293S細胞系相關產品:Michigan Cancer Foundation-12A細胞、MDA-MB-134細胞、HN4細胞 KYSE 180細胞系相關產品:H2108細胞、PT67細胞、OVCAR 432細胞 "
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