"AM-38 epithelioid cells人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。 CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU 1細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞 NCIH322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1116細(xì)胞、H-865細(xì)胞、Henrietta Lacks cells細(xì)胞 H.Ep. No. 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 2H3細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 AM-38 epithelioid cells人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開(kāi)始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫(xiě)傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 MDA-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A-1細(xì)胞、H87細(xì)胞、10RGB細(xì)胞 KAT-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2030細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞、CMT93細(xì)胞 CWR22Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2110細(xì)胞、Det 562細(xì)胞、HME-1細(xì)胞 EOC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞 CHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-2細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 AM-38 epithelioid cells人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞 購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過(guò)程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過(guò)高或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來(lái)表示單位。 Sp2/mIL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa2b細(xì)胞、WM239A細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞 HEC151細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Monomac-1細(xì)胞、LN-382細(xì)胞、253J細(xì)胞 ChaGo-K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、LS123細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞 CHAGOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-3細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞、H322T細(xì)胞 RMa-bm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26WT細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞 Loucy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2/C3A細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞 L-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIE細(xì)胞、H-2330細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞 Hs68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 114細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞、M21細(xì)胞 HME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 116細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞 P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102PT細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞、RT112細(xì)胞 AM-38 epithelioid cells人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 67NR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839T細(xì)胞、H2195細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞 HCC 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細(xì)胞、Ku812細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞 HEI193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD1細(xì)胞、138MG細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞 HBL-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-I/1細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞、Hs27細(xì)胞 SCC-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2052細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞 C-28I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細(xì)胞、H-1650細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞 C-28I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細(xì)胞、H-1650細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞 MH-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞、KE39細(xì)胞 NCI-H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C 6細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞 Hs 636 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNG-M細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞、A-101D細(xì)胞 MARC 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL2細(xì)胞、CP70細(xì)胞、T-T細(xì)胞 CORL105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞 WEHI-279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31FUJ細(xì)胞、LICCF細(xì)胞、PC14細(xì)胞 CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞 NCI-H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞 Madison細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RF/6A細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞 OCI-Ly 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32Dc3細(xì)胞、LA 4細(xì)胞、SR-786細(xì)胞 SU 86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞 Chinese Hamster Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1568細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞 OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:578T細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞 NTera-2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH7細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞、TKB1細(xì)胞 GM346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 229細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞 A-72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-157細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞 UT-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC-9810細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞、FL62891細(xì)胞 HF-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-7細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞 MV 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞 ARH 77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-14細(xì)胞、MDA-453細(xì)胞、HET1A細(xì)胞 H2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN-8細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞 NTERA2-cloneD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL-261細(xì)胞、MB49細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞 OCI-LY-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/2.8細(xì)胞、MCA38細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞 Hep 3B2.1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞、BT-325細(xì)胞 639 V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD18細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞 RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞 NCIH1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2 B細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞 Hs822T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL6細(xì)胞、HR-1細(xì)胞、HLE細(xì)胞 Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞 LLC-MK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-9細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞 H19-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞 H19-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞 Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1395細(xì)胞、87 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