"L2 epithelioid cells大鼠肺泡上皮細胞系 細胞背景資料:肺; Lewis 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 TMD8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞 BPH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞 NCI-H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞 細胞生長:貼壁 L2 epithelioid cells大鼠肺泡上皮細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 F36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa-2細胞、WM-266-4細胞、373MG細胞 HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞 JVM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1 ad細胞、Caco-2 BBe細胞、SaOS-2細胞 SHP77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-683細胞、PFSK細胞、TE-10細胞 Hx-147細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 L2 epithelioid cells大鼠肺泡上皮細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! Epstein-Barr-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞 SPCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-688A-T細胞、BC-020細胞、CAL62細胞 NCI-H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞 HDLM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞 HUSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞 Z138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H520細胞、HeLa 229細胞、KATOIII細胞 COLO 320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE-2細胞、UM-UC-3細胞、NCI-H1876細胞 NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞 NCIH1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞 TE-671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM8細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞、ROS 17/28細胞 L2 epithelioid cells大鼠肺泡上皮細胞系 Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞 COLO_320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK-1細胞、SUDHL-8細胞、H22細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞 HCC-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞 L363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞 KYSE-450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞 KYSE-450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞 NCIH727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞 KLM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1細胞、KALS1細胞、MEL細胞 MDAPCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞 SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞 Strain L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞 MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞 DH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞 LICR-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK10a細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、T-ALL 1細胞 IPLB-SF 21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞 SK MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞 GM05887細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL.2H3細胞、H-209細胞、ZR75_1細胞 V 79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞 MRMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞 THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞 NW-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag1.2.3細胞、BEAS-2B細胞、Mevo細胞 L132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞 TGBC11TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞 LN 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞 MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞 MOLT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞 Vero 76 clone E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞 NCIH2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-422細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、OCILY7細胞 MKN-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H820細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞、HTh 74細胞 P388細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞 A498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-196細胞、C2-C12細胞、OSC19細胞 Farage OL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-36P細胞、SK-RC 52細胞、SK-MEL5細胞 SUM-52-PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 175 VII細胞、HN13細胞、HuH1細胞 NOZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞 HSC(Human Schwann)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞 H-716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞 Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞 NSC34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2/cl.D1細胞、H.Ep. #2細胞、LC1-Sq細胞 SRS-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞 TE-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien-133細胞、Daudi細胞、Wien 133細胞 HCC0078細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞 Epstein-Barr-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞 UCH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞 MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞 F9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞 COLO206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞 WSU-HN13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞 SUIT 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADR細胞、P-3J細胞、SUDHL5細胞 NCIH1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM1細胞、H295R-S1細胞、HCC9204細胞 ECC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞 L2 epithelioid cells大鼠肺泡上皮細胞系 PFSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞 KTA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu-19細胞、EM-3細胞、OVCA5細胞 Mono Mac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoN細胞、VK2/E6E7細胞、PFSK-1細胞 NCI-H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細胞、639V細胞、D324細胞 "
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