"RLE-6TN epithelioid cells大鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! HCC-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMECs細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞、EST50細(xì)胞 alphaTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF.CEM細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞 BT 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU4475細(xì)胞、HS-729細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 RLE-6TN epithelioid cells大鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Ramos (RA 1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hESC細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞 MGECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBR-3細(xì)胞、Hs 611.T細(xì)胞、QBC(939)細(xì)胞 C22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 420細(xì)胞、Ca759細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞 Jijoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞 HS-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-F細(xì)胞、HEK293細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 RLE-6TN epithelioid cells大鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 HT-1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2C8細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞、U266細(xì)胞 C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT4細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞 Hs 636.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO-27細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞、PAa細(xì)胞 DU-4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1359細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞 MCF7-CTRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP-1細(xì)胞、RS411細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞 CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞 V79-GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372E細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞 PC3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSC/hBMSCs細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞 FHCRC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant-522細(xì)胞、SupT1細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞 33604細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-18細(xì)胞、H-711細(xì)胞、U118細(xì)胞 RLE-6TN epithelioid cells大鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞系 SW-954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB 611細(xì)胞、KG1細(xì)胞、PC 12細(xì)胞 GM01232E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞 NCI-SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞 NL20SV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-c細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞 HCC-1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞 OCI/AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL18細(xì)胞、CORL26細(xì)胞、MDA415細(xì)胞 OCI/AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL18細(xì)胞、CORL26細(xì)胞、MDA415細(xì)胞 P3X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 48細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞 NCI-H1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOPC細(xì)胞、SEM細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞 U20-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12F細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞 B78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI6666細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞、ASH3細(xì)胞 Tca8113細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 695T細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞 H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT 2細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞、SF 767細(xì)胞 MDA MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y-R細(xì)胞、MX1細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞 A7r5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCol1細(xì)胞、HuH6細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞 OCI/AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR.OV1細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞 Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞 Chang liver細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-7細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞 G422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGT2細(xì)胞、B16F1細(xì)胞、H-2170細(xì)胞 PBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞、MA-782細(xì)胞 H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞 IMR 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RenCa細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞、H1048細(xì)胞 NCI-H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134VI細(xì)胞、OV3121細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞 Eca 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910/PM細(xì)胞、PC 12細(xì)胞、SNU869細(xì)胞 Hs888T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞、GOS3細(xì)胞 Hs746-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU 4475細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞、KY-270細(xì)胞 C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞 A9 (Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞 PIG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 29細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞 Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞 KU-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC14細(xì)胞、2008細(xì)胞、NKT細(xì)胞 MDA MB 436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞 KU-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC14細(xì)胞、2008細(xì)胞、NKT細(xì)胞 Hs888 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-4C細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95D細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞、UACC812細(xì)胞 A 2780 CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-620細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞 PAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8/V細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞 COR-L26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ 138細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞、JB-6細(xì)胞 COR-L26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ 138細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞、JB-6細(xì)胞 HCC1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞 H1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-1細(xì)胞、U20-S細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞 NCI-H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞 C4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRc1細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞 WML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106細(xì)胞、BCP1細(xì)胞、K7M2細(xì)胞 NIH:OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Super Tube細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞、IMR32細(xì)胞 COLO320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 7860細(xì)胞、A431/P細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞 SCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、4175細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞 RC-K8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-FT細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞、KLN205細(xì)胞 AE1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 357細(xì)胞、WM-266-mel細(xì)胞、MM1S細(xì)胞 MOLT-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKBML細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞 NCI-H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22細(xì)胞、JG細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞 RLE-6TN epithelioid cells大鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞系 RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞、H-2107細(xì)胞 RA 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 1469細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞、C-4 I細(xì)胞 MNNG-HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-3細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞 Hs 636 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNG-M細(xì)胞、AU 565細(xì)胞、A2780細(xì)胞 "
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