"DLM8 epithelioid cellsC3H小鼠骨肉瘤細胞系
細胞背景資料：Dunn's骨肉瘤；雌性；C３H
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
8305C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN28細胞、NCI-H719細胞、SK-MEL2細胞
IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
L Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK1細胞、FRO細胞、Ball 1細胞
細胞生長：貼壁
DLM8 epithelioid cellsC3H小鼠骨肉瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
GM346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞
Soleus clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞
RD-ES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞
H4-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
DLM8 epithelioid cellsC3H小鼠骨肉瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
beta-TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞
NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
Co 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞
1.1B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞
RCC-10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
CV-1 in Origin Simian-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞
P3X63NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞
BrCL15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞
DLM8 epithelioid cellsC3H小鼠骨肉瘤細胞系
NTERA-2 clone D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞
NCI-H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
U-226AR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1417細胞、U-937細胞、WML2細胞
QGP 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
TB-1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞
TB-1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞
SCC25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞
CF-PAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2452細胞、P30/Ohkubo細胞、NCC-IT細胞
U-937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞
UCH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10RGB細胞、LA-N-5細胞、H1944細胞
CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞
WM 266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞
SK-N-BE-2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞
CC-LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2279細胞、TE-11細胞、HEC1B細胞
Panc8.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04680細胞、Nb2a細胞、NCIH660細胞
2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞
MCF12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hs 68細胞、MGc80-3細胞、TM4細胞
TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 6細胞、no.11細胞、GM04154B細胞
NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
HECCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K422細胞、OK細胞、H-1694細胞
786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
SkChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
A 72細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
GM01232細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu212細胞、32D.3細胞、J82 COT細胞
MODE-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞
RT-BM 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞
MV-4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞
H-2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞
GM07404D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞
MDA-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS(TE85)細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞、OC 316細胞
OVCAR 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞
OVCAR 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞
Kasumi 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞
TGBC11T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
NCI-HUT-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
OV 2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞
NRK-52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、Mia PACA 2細胞、PC9細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
TE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞
BJA-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3Ag1.2.3細胞、NE-1細胞、BC-020細胞
H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞
CA46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
RN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞
T-98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞
Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞
TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 6細胞、no.11細胞、GM04154B細胞
Rat podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞
H-2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞
Ca-Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM1215細胞、KPNRTBM1細胞、L-1210細胞
HUASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞
DLM8 epithelioid cellsC3H小鼠骨肉瘤細胞系
Hs819T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
WEHI 164 TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683T細胞、A.704細胞、Colon38細胞
Hs 746.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細胞、T173細胞、OCILY-3細胞
Co 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO829細胞、PLB985細胞、P-36細胞
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