"NCI-H2591 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞背景資料:上皮樣間皮瘤;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 PIG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞 HUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞 MHCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H2591 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學在生命科學科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復(fù)雜,需要的實驗設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SKUT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5 B1-4細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、HepG2細胞 PFSK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞 Institute for Medical Research-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-415細胞、HCC1187細胞、COLO357細胞 Ca 9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞 TE353.SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NCI-H2591 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 RK13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞 A875細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞 MKN-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY-5Y細胞、HPB/ALL細胞、MCF-7細胞 H2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT-5A細胞、OEC19細胞、hTERTHME1細胞 DHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-1 [Human glioblastoma]細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC0070細胞 H2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞 TSU-Pr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞 LYR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、HSC6細胞 SW1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEKO細胞、MOLM-16細胞、Hs1.Tes細胞 SW-954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞 NCI-H2591 epithelioid cells人肺癌細胞系 PNT1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-1細胞、HCCLM6細胞、HLEC-SRA 01/04細胞 COLO 679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞 Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、Panc4.03細胞、HEC251細胞 NS20-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞 DLM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFH細胞、U-343細胞、CC-LP-1細胞 Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞 GM03190A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞 LS-411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞 EFO-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞 C4-2 B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR41P細胞、EB-3細胞、Panc-813細胞 Jurkat Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2Z細胞、D-324MED細胞、RIN-m細胞 hRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS4細胞、LSECs細胞、NCI-H1672細胞 BT474細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-727細胞、McA-RH8994細胞、MS-751細胞 Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞 Duck embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞 HLE-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞 4-1st細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞 WI-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞 Clone 166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞 HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞 OS-732細胞系相關(guān)產(chǎn)品:6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞 293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞 NCI-SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞 K422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞 Ca Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞 RKOAS451細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞 NCI-H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞 TPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-4細胞、Mono Mac 1細胞、U-373MG細胞 PT67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22Rv1細胞、OCILY3細胞、CCD841CoN細胞 MPVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239A細胞、PL-9細胞、Hs819.T細胞 COLO678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞 HS-940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞 HR-8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞 LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞 P31FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞 COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞 SKNDZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞 Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞 H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞 HEK-293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6細胞、FTC-133細胞、COLO 320DM細胞 H-748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel624細胞、MARC 145細胞、SK-RC 39細胞 S-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs578Bst細胞、Vero 76 clone E-6細胞、QGY 7701細胞 LTEPa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞 SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2E8細胞、JurkatE6-1細胞、X63-Ag8.653細胞 KBM-7/Hap8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞 SK MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞 HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞 SNU-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoHH2細胞、NPC-TW01細胞、NCIH1435細胞 SNG-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL5細胞、OVCA432細胞、CCC-HIE-2細胞 CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞 NCI-H2591 epithelioid cells人肺癌細胞系 Caki2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞 NIH:OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly8細胞、GLAG-66細胞、AD-293細胞 Hs 636 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNG-M細胞、AU 565細胞、A2780細胞 MKN-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY-5Y細胞、HFT8810細胞、AG06814-M細胞 "
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