"PC-3M-2B4 epithelioid cells人低轉(zhuǎn)移前列腺癌細胞系 細胞背景資料:前列腺癌;骨轉(zhuǎn)移;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! SKBr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞 KP-N-RT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞 H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞 細胞生長:貼壁 PC-3M-2B4 epithelioid cells人低轉(zhuǎn)移前列腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HSC 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞 Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞 Colo-678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞 MC3T3-E1(C4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞 SAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 PC-3M-2B4 epithelioid cells人低轉(zhuǎn)移前列腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 HEK293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞 GL-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞 SK ES 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞 NCI H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞 LS 174 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞 HECCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K422細胞、OK細胞、H-1694細胞 Hs839T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG ATCC細胞、PANC0203細胞、SK-Hep1細胞 ZR75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1522細胞、SCC VII細胞、HEC1-B細胞 RGC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞 HHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322細胞、HTori3細胞、DOK細胞 PC-3M-2B4 epithelioid cells人低轉(zhuǎn)移前列腺癌細胞系 HOS-TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkMel31細胞、MS1細胞、OCI/AML-4細胞 L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞 DV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞 Human podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞 Hs 766.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞 NCI-H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞 3T3L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATHa細胞、RKOAS451細胞、HCC-2185細胞 GA-10 clone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞 PANC-02-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞 RT4-D6-P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞 SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞 SUSM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞 HCC1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞 G519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞 NCI-H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞 KATO 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞 Hos TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS1細胞、H650細胞、ACC3細胞 NCI-H78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞 CCD 966 SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞 GM07404A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞 BJAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞 H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞 LUDLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY3細胞、CT-26 WT細胞、K562細胞 Transformed Human Liver 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