"BAR-T epithelioid cells人食管上皮細胞系 細胞背景資料:食管;HGNC-TERT轉(zhuǎn)化;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞 SR-786細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-4細胞、EFM-192B細胞、SK-RC-52細胞 H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞 細胞生長:貼壁 BAR-T epithelioid cells人食管上皮細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復(fù)雜,需要的實驗設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Colo16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞 H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞 SU-DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-522細胞、SW 579細胞、NIHOVCAR3細胞 LAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞 AHH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 BAR-T epithelioid cells人食管上皮細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞 HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞 MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞 GM03569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA-87-1細胞、NCIH3255細胞、BV2細胞 GM03573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞 16-HBE14o細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12-PM6細胞、HEC1-B細胞、P-388D1細胞 U-2 OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞 DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1184細胞、UPCI:SCC090細胞、NCIH727細胞 NHA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞 RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞 BAR-T epithelioid cells人食管上皮細胞系 UWB1.289+BRCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 1細胞、MDA-MB-435細胞、SUM149細胞 CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞 TERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-55細胞、GM00637I細胞、H4-II-E細胞 LS-411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞 GOS-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞 PC-9/S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞 IFRS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞 BHP-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞 Bat lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞 CCD 966 SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞 KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞 OS-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞 JC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞 Detroit562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞 LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞 HLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞 RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞 3T3-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞 T 98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞 NCIH3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞 NCI-H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞 hCMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞 H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞 OsACL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞 TKB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Lung-1細胞、AMC-HN-8細胞、KYSE270細胞 RGC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞 3-LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞 CNE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT15細胞、RMC-1細胞、MDA-330細胞 GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞 KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞 KOPN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞 MADB 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞 Hep G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU1細胞、NCI-H187細胞、C8166-CD4細胞 SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞 DBTRG-05MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞 SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞 FRhK4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH508細胞、CCLP-1細胞、Tn 5B1-4細胞 C32 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞 SKML-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞 HL60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞 HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞 IOSE-Mar細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞 KE-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs706T細胞、SUP-B1細胞、T47D:A細胞 3T6 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283-MED細胞、NCI H23細胞、TI-73細胞 LS 123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS1034細胞、GRSL細胞、YTMLC-90細胞 Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞 EU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞 MUS-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞 DU4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP細胞、MT-4細胞、KTC1細胞 NCI-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞 TE353.SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞 BAR-T epithelioid cells人食管上皮細胞系 K-1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞 Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細胞、NCI-H-128細胞、EC-GI細胞 SKCO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAT細胞、HC11細胞、STC-1細胞 MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB-1細胞、HEK 293 EBNA細胞、OV-CA 432細胞 "
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