"T-HEECs epithelioid cells人正常食管上皮細胞系 細胞背景資料:食管;上皮細胞;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 Molm 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞 U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞 NCI-H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞 細胞生長:貼壁 T-HEECs epithelioid cells人正常食管上皮細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KU 812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞 GM06141B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞 786-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞 SKNBE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV-433細胞、BC3H-1細胞、JS1細胞 GM07404D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 T-HEECs epithelioid cells人正常食管上皮細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! CL1.0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞 LNCaP C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB1細胞、HCE細胞、MAD109細胞 NCI-H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞 BIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1563細胞、Adeno 293細胞、Panc-3_27細胞 HT1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH30SJ細胞、RL-65細胞、NK62a細胞 Neuro2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞 GH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞 SCC25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞 BT-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET1A細胞、Eph4 1424細胞、G-292 clone A141B1細胞 Tissue Culture-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞 T-HEECs epithelioid cells人正常食管上皮細胞系 CCD-1112sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞 SK-N-BE-2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞 HG2855細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞 MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞 Chinese Hamster Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1568細胞、PNT1-a細胞、COLO-320-DM細胞 PNEC30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞 PNEC30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞 HEK-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞 Capan 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞 Cloudman M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞 NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞 MCF-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞 NCI-H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞 FRO 81-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE1細胞、Ect1/E6E7細胞、IMCD3細胞 SKOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞 SK-RC 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-15細胞、HT1080細胞、NCI.H23細胞 TSCC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞 AKR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞 SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZ細胞、LICR-HN-6細胞、NF639細胞 SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZ細胞、LICR-HN-6細胞、NF639細胞 KU19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPa2細胞、GalK1細胞、PLB-985細胞 EFM192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞 GM2219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞 JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞 SK-LMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE1細胞、MDCC-MSB-1細胞、NCI-SNU-1細胞 KMS11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞 Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞 OE33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMC細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、SK Hep1細胞 HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 4細胞、Adeno-293細胞、H2052細胞 KTCTL140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞 CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞 H2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT-5A細胞、OEC19細胞、hTERTHME1細胞 RN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞 MCA-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN 1細胞、MOLT 3細胞、OCI Ly10細胞 ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞 SK-RC 42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 13細胞、Hs 870.T細胞、USMC細胞 JM-Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK-1細胞、TE85細胞、Hs274T細胞 HITT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-1細胞、Lu-65細胞、HR-1細胞 L-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞 H9c2 (2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞 ZR751細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞 HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞 HCC1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-829細胞、3T6細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞 Ramos G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細胞、T-ALL-1細胞、MDA-MB-175VII細胞 EHEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞 CCD-841-CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞 MDAMB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞 RMG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞 NCI-H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞 HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞 A2780CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK6細胞、HRIF細胞、H508細胞 T-HEECs epithelioid cells人正常食管上皮細胞系 BC-027細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS細胞、SW 620細胞、CT-26 WT細胞 FTC133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1395細胞、Capan2細胞、MC3T3E1細胞 LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細胞、T98G細胞、Hs578Bst細胞 NCI-H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細胞、RH30SJ細胞、SK BR 03細胞 "
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