"TE 671 epithelioid cells人胚胎橫紋肌瘤細胞系 細胞背景資料:胚胎性橫紋肌肉瘤;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 P560細胞系相關產(chǎn)品:HuT-78細胞、H889細胞、OVCAR-10細胞 H841細胞系相關產(chǎn)品:B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞 CMT-64細胞系相關產(chǎn)品:GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞 細胞生長:貼壁 TE 671 epithelioid cells人胚胎橫紋肌瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 H-69細胞系相關產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞 CHP126細胞系相關產(chǎn)品:HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞 SK-ES1細胞系相關產(chǎn)品:HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞 GM01232E細胞系相關產(chǎn)品:P3.times.63 Ag8.653細胞、CATH.a細胞、RS 4;11細胞 UPCISCC154細胞系相關產(chǎn)品:FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 TE 671 epithelioid cells人胚胎橫紋肌瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! RAMOS2G64C10細胞系相關產(chǎn)品:McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞 KMST6細胞系相關產(chǎn)品:MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞 KBM-5細胞系相關產(chǎn)品:BPH-1細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、Oregon J-111細胞 Hepa 1-6細胞系相關產(chǎn)品:H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞 WM 451-Lu細胞系相關產(chǎn)品:HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞 NEC細胞系相關產(chǎn)品:U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞 Tb1Lu細胞系相關產(chǎn)品:J-774細胞、SUM-52細胞、BE(2)C細胞 DoHH2細胞系相關產(chǎn)品:VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞 U-343 MG細胞系相關產(chǎn)品:MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞 HMVEC細胞系相關產(chǎn)品:NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞 TE 671 epithelioid cells人胚胎橫紋肌瘤細胞系 SKO007細胞系相關產(chǎn)品:L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞 Case 3細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞 SUDHL8細胞系相關產(chǎn)品:OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞 NCIH1623細胞系相關產(chǎn)品:MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞 MDA-MB 453細胞系相關產(chǎn)品:LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞 MCF-7ADR細胞系相關產(chǎn)品:Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞 MCF-7ADR細胞系相關產(chǎn)品:Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞 NUGC-2細胞系相關產(chǎn)品:LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞 UM-UC-3細胞系相關產(chǎn)品:16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞 P3J.HR1K細胞系相關產(chǎn)品:H-510A細胞、B16BL6細胞、SUSM1細胞 WM451Lu細胞系相關產(chǎn)品:HS 1.Tes細胞、U-138 MG細胞、NK10a細胞 U138-MG細胞系相關產(chǎn)品:HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞 SK-RC 52細胞系相關產(chǎn)品:BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞 LMH細胞系相關產(chǎn)品:SAOS 2細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞、NCI-H920細胞 ACC-3細胞系相關產(chǎn)品:4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞 PC-9/S1細胞系相關產(chǎn)品:SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞 CWR22R細胞系相關產(chǎn)品:EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞 95C細胞系相關產(chǎn)品:BT474細胞、Lu-99A細胞、UO.31細胞 A253細胞系相關產(chǎn)品:RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞 VMRC-LCD細胞系相關產(chǎn)品:M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞 HD11細胞系相關產(chǎn)品:GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞 Dunn LM8細胞系相關產(chǎn)品:343MG細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、BMSCs(mBMSCs)細胞 COLO 680N細胞系相關產(chǎn)品:SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞 EB1細胞系相關產(chǎn)品:Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞 OVCA432_Bast細胞系相關產(chǎn)品:NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞 MOLT16細胞系相關產(chǎn)品:J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞 H838細胞系相關產(chǎn)品:E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞 HMy2.CIR細胞系相關產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞 293 EBNA細胞系相關產(chǎn)品:Calu 3細胞、SUM159細胞、B 95-8細胞 MPC 11細胞系相關產(chǎn)品:KLE細胞、H1105細胞、SEG-1細胞 BL1339細胞系相關產(chǎn)品:L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞 SUM-52PE細胞系相關產(chǎn)品:GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞 NBL-5細胞系相關產(chǎn)品:RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞 GMK,BSC-1細胞系相關產(chǎn)品:TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞 KPL-4細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1417細胞、SW626細胞、BMDC細胞 LM6細胞系相關產(chǎn)品:NFS 60細胞、NCI-H735細胞、P30-OHKUBO細胞 U-251 MG細胞系相關產(chǎn)品:AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞 BSC40細胞系相關產(chǎn)品:J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞 KYSE 140細胞系相關產(chǎn)品:KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞 GH 3細胞系相關產(chǎn)品:HLCL9B10細胞、SP-2/0-AG14細胞、SU-DHL2細胞 H920細胞系相關產(chǎn)品:HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞 PVEC細胞系相關產(chǎn)品:L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞 HCC1187細胞系相關產(chǎn)品:ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞 MKN 28細胞系相關產(chǎn)品:AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞 MCA38細胞系相關產(chǎn)品:U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞 Swiss3T3細胞系相關產(chǎn)品:3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞 NIE 115細胞系相關產(chǎn)品:B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞 COV362細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞 Sp2/0細胞系相關產(chǎn)品:H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞 E.G7-OVA細胞系相關產(chǎn)品:EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞 SU-DHL6細胞系相關產(chǎn)品:HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞 TE 671 epithelioid cells人胚胎橫紋肌瘤細胞系 GM05887細胞系相關產(chǎn)品:RBL.2H3細胞、H-209細胞、ZR75_1細胞 Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關產(chǎn)品:C4I細胞、M109細胞、CCLP1細胞 SGC7901/DDP細胞系相關產(chǎn)品:MHCC 97-H細胞、MGSMC細胞、SHG44細胞 Kato-III細胞系相關產(chǎn)品:Ramos 1細胞、HCC-1954細胞、1E8-H細胞 "
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