"NCI-H187 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系 細胞背景資料:經(jīng)典小細胞肺癌;胸腔積液轉(zhuǎn)移;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 32Dcl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞 EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞 CCD-966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H187 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SKG IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞 Sp 2/0-Ag 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞 HPB/ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞 CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞 WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NCI-H187 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系 細胞生長特性:懸浮 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞 PA I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞 NCIH2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞 SUM 149細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit-562細胞、CHL1細胞、HT(H9)細胞 SHP77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-683細胞、PFSK細胞、TE-10細胞 UCLA-SO-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H650細胞、HDSMC細胞、H-711細胞 VE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞 MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞 HFT-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1155細胞、TJ905細胞、Capan2細胞 A-375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞 NCI-H187 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系 Clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞 LS-174細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞 H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞 C-33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞 FHL-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞 NCI-HUT-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞 NCI-HUT-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞 BRL-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞 NCIH1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞 KPL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-940-T細胞、C2BBe1細胞、MV 3細胞 CAL-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞 H-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞 MBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞 WEHI 164 TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞 JM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞 alpha-TC1.6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 522細胞、MV 4;11細胞、Leydig細胞 Emory University-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞 IGR.OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197細胞、C38細胞、GM17346細胞 HVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML5細胞、1.1B4細胞、BLO 11細胞 MCF-7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞 ACC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞 ARO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞 624mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞 PTK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIII細胞、OVCAR3細胞、MDA-MB-435 S細胞 JB6 [Mouse]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞 H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞 KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞 RPMI #1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞 NCI-H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞 CAL851細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞 RM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞 P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞 OK-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞 HIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞 H-1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞 CW2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-2細胞、MJ細胞、HS 683T細胞 JIMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞 T98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞 KYSE-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞 Metastatic Variant 522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR-75-30細胞、MV3細胞、MKN-74細胞 Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞 KRC Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞 CoCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞 JEKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞 M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞 U-138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞 Sp2/O-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞 AU565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞 KCL-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞 OVCA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞 LNCaP subline C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss3T3細胞、SK_HEP1細胞、CHO/dhFr-細胞 NCI-H187 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞系 Mouse INsulinoma 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞 Tn-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細胞、RAG細胞、NCI-H676B細胞 H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Giant Cell Tumor細胞、NCI-H146細胞、COLO 201細胞 NCIH2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-382細胞、PaTu8988s細胞、NCI-H322細胞 "
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