"A-72 epithelioid cells犬癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:癌細(xì)胞;金毛獵犬 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。 BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞 H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞 Strain V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NeHepLxHT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 A-72 epithelioid cells犬癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同時(shí),務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對(duì)細(xì)胞而言差異極大,請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 3T3-442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-MeWo細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞 J774A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H676細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞 Hs 742.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細(xì)胞、H-1435細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞 OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞 PANC0203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-BR3細(xì)胞、SNU423細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 A-72 epithelioid cells犬癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 DMS79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-1細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞、BGC-823細(xì)胞 Kasumi 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2-11細(xì)胞、PC.3細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞 C4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRc1細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞 OCI-Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T84細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞 HLFa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1563細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、H2196細(xì)胞 SW 1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細(xì)胞、T. T細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞 RSC96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、H-322細(xì)胞、Y 1細(xì)胞 A.704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞 KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞 NCIH1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHG-5細(xì)胞、293-GP細(xì)胞、JIII細(xì)胞 A-72 epithelioid cells犬癌細(xì)胞系 HEK 293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs870T細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞 HGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE12細(xì)胞、RC92A細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞 H-1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-3細(xì)胞、MLMEC細(xì)胞、CPA47細(xì)胞 CTX TNA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6 Cl 30細(xì)胞、USMC細(xì)胞、C-32細(xì)胞 16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞 JTC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞 SCL-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C41細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞 H-647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225/K6細(xì)胞、P3X63 AG 8.653細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞 NCIH1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CW2細(xì)胞、SUM52PE細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞 NCI-H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26-clone 25細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞 NCI H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21細(xì)胞、Human podocyte細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞 Scott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOS3細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞、SW1116細(xì)胞 Mc Ardle 7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC-PRF-5細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞 NTera2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu8988s細(xì)胞、253J B-V細(xì)胞、CoC1細(xì)胞 BC-027細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞 Lewis Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI231細(xì)胞、UMNSAH/DF#1細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞 H711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD-3細(xì)胞、SW 982細(xì)胞、MGHU3細(xì)胞 BNL-CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-MEL-38細(xì)胞、HSF細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞 BTI-Tn5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 281.T細(xì)胞、CNE2細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞 NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞 LS-411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1693細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞 TALL-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mino細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞 CD18/HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-9細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞 MPC 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLE細(xì)胞、H1105細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞 HEK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0366細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞、Namalva細(xì)胞 SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mac-1細(xì)胞、EU-4細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞 UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞 WEHI-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BERH-2細(xì)胞、PC-12細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞 Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞 NCI-SNU-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159細(xì)胞、H-2029細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞 LTEPsm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H596細(xì)胞、ONS76細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞 HCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRMT-1細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞 HCC366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞 HGMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE 296細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞 SNUC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細(xì)胞、H-727細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞 Caov-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR983F細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞、SW13細(xì)胞 P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞、B16F1細(xì)胞 NCI-H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、H-2591細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞 H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞 COLO-394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞 H-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2 ad細(xì)胞、FHL124細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞 COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞 HEC1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 2細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞、OE-21細(xì)胞 H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞 Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA1細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞 HLE-B3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK-3細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞 Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-548細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞 SW 1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2817細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞、MDA231細(xì)胞 JB6Cl30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLO-Y4細(xì)胞、H661細(xì)胞、DHL4細(xì)胞 SK-LU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 3細(xì)胞、LN 382細(xì)胞、211H細(xì)胞 Jurkat-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、CP-70細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞 A-72 epithelioid cells犬癌細(xì)胞系 Det. 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H19-7細(xì)胞、SNU620細(xì)胞、MES 13細(xì)胞 MCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MONO-MAC 6細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞、H-1648細(xì)胞 MeSoTheliOma-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87細(xì)胞、KU-812細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞 C4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRc1細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞 "
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