"NP69SV40T epithelioid cells人鼻咽上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：鼻咽；上皮細(xì)胞；SV４０轉(zhuǎn)化
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
SP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FBHE細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞
PIGI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL 16細(xì)胞、HS-683細(xì)胞、Y3細(xì)胞
HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
NP69SV40T epithelioid cells人鼻咽上皮細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無(wú)菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌，不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾，勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無(wú)菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒(méi)有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NIT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA 87細(xì)胞、Co-115細(xì)胞、HCC202細(xì)胞
Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞
LAD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞
COS7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、HR1K細(xì)胞、Vx2細(xì)胞
3T3-A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、SupB15WT細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NP69SV40T epithelioid cells人鼻咽上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
HIT.T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M3 Clone M-3細(xì)胞、H7721細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞
SNU16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL39細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞
Gerner 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 821.T細(xì)胞、RT 112細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞
hSCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 295細(xì)胞、K1735細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞
MDA-MB-468-RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞
MCF/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M-17細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞
AR41P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW527細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-1細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞、GM-215細(xì)胞
T/GHA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞
C33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞
NP69SV40T epithelioid cells人鼻咽上皮細(xì)胞系
NCI-H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H735細(xì)胞、PL 45細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞
MFE296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL1細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞、HBL1細(xì)胞
GM03570E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-2細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞
Vero E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60細(xì)胞、OCIAML3細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞
SKOV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1703細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞、MC-26細(xì)胞
MCF10-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、SNU387細(xì)胞、SNU251細(xì)胞
MCF10-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、SNU387細(xì)胞、SNU251細(xì)胞
Psi-2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT 8810細(xì)胞、SJRH 30細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞
Hs706T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR786細(xì)胞、JC細(xì)胞、Panc02細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIBEpiC細(xì)胞、HRA19細(xì)胞、P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞
RPMI-7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T HEECs細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞、Hs281T細(xì)胞
NCIH740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95C細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞
HPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FF-WT-BJ細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞、RFL6細(xì)胞
NCI-H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-8細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞
MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC-133細(xì)胞、COLO201細(xì)胞、A-2780細(xì)胞
CA922細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT4細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞、SK-N-SH細(xì)胞
OLN-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA 01/04細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
H-548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHL-5細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞、HR8348細(xì)胞
HUT125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE 12細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞
SK RC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1-P細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞
LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞
HIT.T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M3 Clone M-3細(xì)胞、H7721細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞
526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-52細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞、H548細(xì)胞
Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞
Colo-206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、V-79細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞
MDA-PCa-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2110細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞、MLMEC細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
U138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
SNU387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3L1細(xì)胞、SNU739細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞
H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC clone 6細(xì)胞、Med 341細(xì)胞、MKN74細(xì)胞
NPC-TW039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison lung細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞
16HBEo-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH3255細(xì)胞、MH7A細(xì)胞、aNK細(xì)胞
MDA-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A-1細(xì)胞、H87細(xì)胞、10RGB細(xì)胞
H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞
293GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT.549細(xì)胞、H-23細(xì)胞、R3/1細(xì)胞
Hep G2-Luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細(xì)胞、A673細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞
UWB1289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2780 CP細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞、NCIH2081細(xì)胞
293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMC-1細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞
T-CAM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52PE細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞、H1993細(xì)胞
HMy2.CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8.653細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞、MC-38細(xì)胞
Fetal Human Lens-124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞、A-431細(xì)胞
MLA144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA7細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞、Scott and White No. 13細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFB細(xì)胞、PL-5細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞
HEK 293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKML-28細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞
SEG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H929細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞
LS-411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞
HEK-293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP-69細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞
HEK293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞
NCI-H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca 9-22細(xì)胞、HLEC細(xì)胞、JG細(xì)胞
NP69SV40T epithelioid cells人鼻咽上皮細(xì)胞系
EFM192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8-653細(xì)胞、HSC（Human Schwann）細(xì)胞、SU-DHL-8細(xì)胞
P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293A細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞
LS180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW982細(xì)胞、Leydig細(xì)胞、DU_145細(xì)胞
Gerner 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 821.T細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞、HEK293細(xì)胞
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