"McA-RH7777 epithelioid cells大鼠肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:肝癌;雌性;Buffalo 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細(xì)胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱唵?,而且死板。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時(shí)間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個事情,因?yàn)檫@個東西流程長。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細(xì)胞都污染一個細(xì)菌的話,這個細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。 UPCI:SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞 RCC10 RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞 CEM-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:33604細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 McA-RH7777 epithelioid cells大鼠肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀枞^濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 bEnd3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-7細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞 B16 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞 C643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VCaP細(xì)胞、CL1細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞 HOS TE 85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293AD細(xì)胞、LI7細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞 PIG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 29細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 McA-RH7777 epithelioid cells大鼠肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。 CORL88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1819細(xì)胞、Vx2細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞 NCI H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC78細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞 MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞 YD-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ketr3細(xì)胞、NSC34細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞 LLC-MK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、PC3細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞 NCIH2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:74Int細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞 CAL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N1細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞、KM932細(xì)胞 ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARA-B細(xì)胞、H-526細(xì)胞、SGC996細(xì)胞 CFPAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PJ34細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞、G-402細(xì)胞 HeLa S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H82細(xì)胞、H676B細(xì)胞、Mink細(xì)胞 McA-RH7777 epithelioid cells大鼠肝癌細(xì)胞系 3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞 QGY7703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat77細(xì)胞、PK-15細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞 MPC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細(xì)胞、MC 116細(xì)胞、H1355細(xì)胞 HDLM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-115細(xì)胞、HIC細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞 PC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-2650細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞 CNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT15細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞 CNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT15細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞 Alexander cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 c18細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞 SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞 H-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC-1細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞 J82COT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MES 1細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、SJCRH30細(xì)胞 FM88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞、SKO007細(xì)胞 GCT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞 CoC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞 L132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 579細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞 Hs832T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA I細(xì)胞、SCL I細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞 Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞 A375-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 746.T細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞 LL/2 (LLC1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞 COLO-741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF2細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞 C-Lu65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-2細(xì)胞、RCC10細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞 LA-N-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞 HTR-8/SV neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BDCM細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞 MN-9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac6細(xì)胞、BT549細(xì)胞、H-2405細(xì)胞 GI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-10細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞 Swiss-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1688細(xì)胞、Capan2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞 Mhh-Call 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP2-293細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞、J 774A.1細(xì)胞 LK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3396細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞 IMCD3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P560細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞 RPTEC/TERT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞 BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H209細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞、COLO679細(xì)胞 NCI-H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2141細(xì)胞、MV 3細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞 HFLS-RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa-T細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞 FU-MMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1a細(xì)胞、H-522細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞 NBL_S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞 OsACL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、LU65細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞 HEY A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-180細(xì)胞、H-2198細(xì)胞、CMK細(xì)胞 MSTO-211 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1666細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞 MIO-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL12細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞 MMVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE 280細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞 A549ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1435細(xì)胞、SJCRH30細(xì)胞、RGB細(xì)胞 293/EBNA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_FI細(xì)胞、Ly3細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞 KRCY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK-II細(xì)胞、Ly18細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞 L 132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、MES-13細(xì)胞、H1694細(xì)胞 Jurkat-FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-1細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞、H-508細(xì)胞 SK-MEL-2-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VE細(xì)胞、CORL105細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞 Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 540細(xì)胞、RMC細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞 SKLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel1細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞 A2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK6細(xì)胞、HRIF細(xì)胞、H508細(xì)胞 HEC-1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞 NCIH2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361mel細(xì)胞、A10細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞 McA-RH7777 epithelioid cells大鼠肝癌細(xì)胞系 BEL 7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H128細(xì)胞、D-341細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞 NCI-H2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL28細(xì)胞、HIT細(xì)胞、COLO824細(xì)胞 RKOE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190PT細(xì)胞、MeT5A細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞 MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞、RCC_7860細(xì)胞 "
上海賓穗生物科技有限公司
聯(lián)系商家時(shí)請?zhí)峒癱hemicalbook,有助于交易順利完成!
上海賓穗生物