"FHs 74 Int epithelioid cells人小腸正常細胞系 細胞背景資料:小腸 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 H-661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4M細胞、MKN7細胞、HCC1359細胞 L 132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、MES-13細胞、H1694細胞 Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞 細胞生長:貼壁 FHs 74 Int epithelioid cells人小腸正常細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NPC-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞 DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞 MDCK (NBL-2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞 Sp2/0-Ag-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞 CCLP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW-039細胞、CORL51細胞、A20細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 FHs 74 Int epithelioid cells人小腸正常細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! COLO679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞 HEL-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞 MLO-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELF細胞、Hs 832(C).T細胞、Jiyoye (P-2003)細胞 RM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞 Panc 5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WBF344細胞、CA-OV-3細胞、MESSA Dx5細胞 GAK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞 Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞 NTHY-ORI3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞 COLO320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞 D341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞 FHs 74 Int epithelioid cells人小腸正常細胞系 ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞 C6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1975細胞、GNM細胞、MUTZ-3細胞 NPC-TW 039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、LLC PK1細胞、CAL51細胞 OPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞 Vero C1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞 H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC38細胞、SKMES-1細胞、BC-025細胞 LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1500細胞、UCLA-SO-M14細胞、H-35細胞 MV(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞 TR-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞 NCI-H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞 IPLB-SF-21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞 HSC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞 H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞 SNT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD33Co細胞、OCI-LY-10細胞、HP615細胞 NCI-SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞 Hs940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞 U-251_MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞 H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞 TKB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip[973]細胞、GM05862細胞、NCI-H1694細胞 HuNS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞 OVCAR.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞 NSC-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞 Jurkat-FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞 RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞 PLA801-95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞 MFE 280細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 64細胞、SK ES 01細胞、HCC-1833細胞 MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞 SF539細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562細胞、SJ-Rh 30細胞、3T3NIH細胞 PC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞 MILE SVEN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞 NTERA-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞 BJAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞 Melan-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞 MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞 LC-1 sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM/C1細胞、NCI-H1618細胞、Bac1 2F5細胞 HOS (TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞 Pro-5WgaRI3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞 Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞 COLO 320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197.T細胞、WPMY1細胞、SK-MEL-2-LUC細胞 BHT-101細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO211H細胞、DV-90細胞、JeKo 1細胞 HCC2157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞 Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞 U-hth74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞 H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞 SUM 159細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞 MDAMB435S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/BBe 1細胞、TOV21細胞、NCI-SNU-520細胞 Blotchy fibroblast-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mevo細胞、OCI-AML-3細胞、UMC11細胞 JTC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞 TALL-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞 NR 8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-30細胞、SF 539細胞、PLC8024細胞 Pro-Lec1.3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞 FHs 74 Int epithelioid cells人小腸正常細胞系 H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H889細胞、T-84細胞、PLA802細胞 NB-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HREC細胞、NP69細胞、16-HBE細胞 OKT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-638細胞、Walker-256-TC細胞、HIBEC細胞 MLO-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELF細胞、HMEC細胞、SKNMC細胞 "
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