"PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞系 細胞背景資料:前列腺癌;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞 NIHOVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞 KYSE70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞 細胞生長:貼壁 PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HUASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞 NCIH716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573A細胞、3D4/21細胞、AMJ2C8細胞 NCI-H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞 Jurkat (clone E6-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞 HT 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 ONS76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞 SCC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2135細胞、CCD-841-CoTr細胞、NIH:OVCAR-10細胞 HIT clone T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞 FRhK-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC-18細胞、EA hy 926細胞、WEHI-164細胞 GM03671C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞 HBZY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞 HCC-9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細胞、L-6 myoblast細胞、697細胞 HEH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞 CORL88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞 Evsa-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞 PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞系 H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-3細胞、SN-12C細胞、NCI-H250細胞 SUD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNTEC細胞、T HEECs細胞、Hs688(A)T細胞 H-2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞 NCI-H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞 NCI-H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞 H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞 H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞 BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞 NB-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞 SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞 JOSK-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNO-1細胞、Colo699細胞、HcaF細胞 HGC27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞 BALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞 DMS-53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞 MDCK Type II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞 A 253細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞 C8-D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞 BT325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY細胞、J82細胞、HuH7細胞 NL-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞 MESSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞 HCT/FU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 27細胞、Panc-1-P細胞、HUVSMC細胞 MDAMB361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞 MUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞 A7r5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞 NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞 CORL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞 SK-MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞 Y3-Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞 H-847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞 HPB-ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞 LS-174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞 GDM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞 Balb/c 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞 COLO-829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞 GP293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812細胞、CL-11細胞、BMSC/hBMSCs細胞 NCIH716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573A細胞、3D4/21細胞、AMJ2C8細胞 Walker-256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞 A1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞 V-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞 Medical Research Council cell strain-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞 L132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞 MiaPaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞 HCC-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞 P3-X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-11細胞、RMS1598細胞、MUTZ-1細胞 QGY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞 SW-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK (NBL-1)細胞、IM 9細胞、NR 8383細胞 NCI-H209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA.1細胞、H1693細胞、KBM-7細胞 TCC-PAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞 AMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞 CV-1 in Origin Simian-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞 THLE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞 PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞系 NCIH1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞 N-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:108CC15細胞、CNE-1細胞、MDA-MB-330細胞 ANA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-127細胞、NRK-49F細胞、NK92-MI細胞 HIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-157細胞、HCC-827細胞、50.B1細胞 "
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