"MN9D epithelioid cells小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞系 細胞背景資料:多巴胺能神經(jīng)元細胞 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! J 111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞 Kupffer細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞 TCMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞 細胞生長:貼壁 MN9D epithelioid cells小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SK_HEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞 OCI-Ly 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE8細胞、RGCs細胞、A549 ATCC細胞 RCC_7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞 UMNSAH-DF 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOL1細胞、SK.MEL.2細胞、H2052_MM細胞 Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 MN9D epithelioid cells小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 MPP89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞 KNS62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK-2細胞、AML12細胞、SKNEP-1細胞 A2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞 H-187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞 NCI-H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP FGC細胞、V79細胞、H2087細胞 CL-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-3細胞、HIBEC細胞、NG108-15細胞 B16/F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞 NCIH2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞 H-226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC96細胞、CAL 62細胞、NCI-H28細胞 Vero from pool #76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞 MN9D epithelioid cells小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞系 NCI H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞 MDA MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞 NCI-H2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-104細胞、6-10B細胞、H-1915細胞 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞 PECAPJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT細胞、C518細胞、Hs611T細胞 LS1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞 LS1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞 Monomac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞 NIH 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞 IEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞 RCM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞 Hs940T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞 EOC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞 OLN-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞 AMC-HN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞 GM 637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL 1細胞、MV-1-Lu細胞、HCT15細胞 BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞 Calu-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞 Anip-973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞 SIRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞 KBM-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞 AC29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1-B細胞、H8細胞、GM3190細胞 BLO11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H508細胞、H522細胞、C918細胞 Anip973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞 Tu-686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞 H-2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞 SKHEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞 Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞 MDA 1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞 L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞 H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞 Neuro2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞 SW756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M14細胞、7860細胞、CAL120細胞 H4IIEC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞 U343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞 L-WRN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞 H-250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H520細胞、Functional Liver Cell-7細胞、OUMS-27細胞 KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞 KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞 PGLH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞 Mevo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞 Rat 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMrSV5細胞、NCI-H1792細胞、ACT-1細胞 HTR8svn細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞 FK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-10細胞、DMS53細胞、A375SM細胞 PL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞 Daudi細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞 KG1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞 H-1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞 HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞 NCIH1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞 DAN-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞 MN9D epithelioid cells小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞系 TGHAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞 GM06141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-I細胞、LC1sq細胞、NK62a細胞 SW-48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 16細胞、PTK 2細胞、OVMANA細胞 A2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsACL細胞、PANC.1細胞、NE1-E6E7細胞 "
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