"MN9D Cell:小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞、H-2107細(xì)胞
KS-SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-668細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞
NCIH1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888Lu細(xì)胞、LLC1細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
MN9D Cell:小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中相關(guān)問(wèn)題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過(guò)高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤(pán)之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級(jí)和無(wú)菌過(guò)濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級(jí),必須為T(mén)issue culture grade之DMSO,其本身即為無(wú)菌狀況,次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過(guò)濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-20°C不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時(shí),細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類(lèi)可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞
Y-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞、HEC251細(xì)胞
MDA MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS-9L細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞
PANC 203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE4細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞
NCI-H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
MN9D Cell:小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞系
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很?chē)?yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
HCT-FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 50細(xì)胞、H3255細(xì)胞、HCT-8細(xì)胞
KPL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-940-T細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞、MV 3細(xì)胞
NCI-H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134VI細(xì)胞、OV3121細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞
G 292 Clone A 141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HEECs細(xì)胞、COV504細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞
C-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細(xì)胞、JIMT細(xì)胞、GM-637細(xì)胞
KYSE 140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU19-19細(xì)胞、SG231細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞
PLC/PRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 510細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞
MN9D Cell:小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞系
VAESBJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ELD-1細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞
CCD 966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS 751細(xì)胞、DHL8細(xì)胞、TGBC11TKB細(xì)胞
MCF7-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS-1細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞
HS766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL(2)細(xì)胞、HMO6細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞
NCI-H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1610細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞、HFL1細(xì)胞
IPEC-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞
Vero-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、KMS26細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞
SUDHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-119細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞、COS1細(xì)胞
ZR-75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-522細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞
J82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y1細(xì)胞、SW-480細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞
GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1373細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞
Me-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞、SW837細(xì)胞
293 Ad5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MO59J細(xì)胞、639V細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞
H378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH 8994細(xì)胞、H-929細(xì)胞、293H細(xì)胞
NCIH847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPM2細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞、H23細(xì)胞
A-375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCa/16A3-F細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞、NR8383細(xì)胞
GA-10 clone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388.D1細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞
UCLA-SO-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H650細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞、H-711細(xì)胞
Huh7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細(xì)胞、MM96L細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞
CCD18Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE B-3細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-97細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞
Sp2/O-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUVEC細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞、H-87細(xì)胞
rHSC-99細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624細(xì)胞、Onda 11細(xì)胞、Panc327細(xì)胞
EM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WISH細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞、Mino細(xì)胞
NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-600-T細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、293 H細(xì)胞
SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞
H510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-5細(xì)胞、PLB 985細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞
IOSE 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2330細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞、FHC細(xì)胞
MDA-MB-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞
SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2347細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、TPC1細(xì)胞
alphaTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF.CEM細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞
NCTC929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW-42細(xì)胞、GM07404細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞
NG10815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHK細(xì)胞、B78細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞
SKNSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 432細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞、AR41P細(xì)胞
DH-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細(xì)胞、CMT167細(xì)胞、BC-009細(xì)胞
3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag 4/1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA-1細(xì)胞、SCC15細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞
H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM134細(xì)胞、C166細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞
EFO27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2171細(xì)胞、H1417細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞
F81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-90細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞、BHK21細(xì)胞
DiFi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL10細(xì)胞、MLM細(xì)胞、8305C細(xì)胞
Douglas Foster-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2227細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞
BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL148細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞、PL 45細(xì)胞
MN9D Cell:小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞系
COLO-738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞、GM05862細(xì)胞
GM07404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞
MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞
VM-CUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞
Farage細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 52E細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞、H-1522細(xì)胞
G-292 clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB2細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞、LLC1細(xì)胞
MDAMB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-V細(xì)胞、H-596細(xì)胞、no-11細(xì)胞
Hep-G2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-2細(xì)胞、FK81細(xì)胞、CCC-HSF-1細(xì)胞
GM00215A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOSEpiC細(xì)胞、H2122細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞
KBM-7/Hap8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP3B2細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞
HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc2_03細(xì)胞、SK-N-SH細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞
C-Lu65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-2細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞
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