"RBE4 epithelioid cells大鼠腦血管內皮細胞系 細胞背景資料:2型腺病毒轉化;SD大鼠 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! NCTC 1469細胞系相關產品:WiDrTC細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞、HCC-1171細胞 HuCC-T1細胞系相關產品:HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞 LC2/Ad細胞系相關產品:RCM1細胞、McG-1細胞、Hep II細胞 細胞生長:貼壁 RBE4 epithelioid cells大鼠腦血管內皮細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內,水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結構,代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CAL-120細胞系相關產品:Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞 REC-1細胞系相關產品:NCI-H-82細胞、MDA-MB 361細胞、SY5Y細胞 OAW42細胞系相關產品:EAC細胞、M210B4細胞、MDA-MB-175-VII細胞 SkMel31細胞系相關產品:CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞 HEK293S細胞系相關產品:Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 RBE4 epithelioid cells大鼠腦血管內皮細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 MCFs細胞系相關產品:HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞 L-5178-Y-R細胞系相關產品:WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞 MM.1S細胞系相關產品:HCC-1419細胞、C-4I細胞、F36P細胞 Kit225-K6細胞系相關產品:NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞 WM-115細胞系相關產品:NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞 ARO81-1細胞系相關產品:IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞 CMT-64細胞系相關產品:GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞 UK Pan-1細胞系相關產品:HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞 H-1963細胞系相關產品:CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞 RSC96細胞系相關產品:PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞 RBE4 epithelioid cells大鼠腦血管內皮細胞系 L-540細胞系相關產品:FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞 LNCaP-ATCC細胞系相關產品:MLA 144細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞、P3HRI細胞 UMUC1細胞系相關產品:HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞 Suzhou Human Glioma-44細胞系相關產品:52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞 no.11細胞系相關產品:HCE-2 [50.B1]細胞、THC-8307細胞、HCA-7細胞 HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關產品:N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞 HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關產品:N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞 CCK-81細胞系相關產品:H6c7細胞、MA-c細胞、Mouse Colon 38細胞 293AD細胞系相關產品:AHH-1細胞、GC-1spg細胞、UCLA-SO-14細胞 MDA-415細胞系相關產品:HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞 PLA-801D細胞系相關產品:THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞 CA-OV-3細胞系相關產品:HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞 UPCI-SCC-090細胞系相關產品:U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞 Tsup-1細胞系相關產品:CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞 HEK 293T/17細胞系相關產品:SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞 MNNG細胞系相關產品:I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞 4175細胞系相關產品:OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞 Mink細胞系相關產品:ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞 MEC-1細胞系相關產品:HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞 NK92細胞系相關產品:HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞 H3255細胞系相關產品:RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞 NCIH2081細胞系相關產品:74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞 NCTC929細胞系相關產品:OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞 NCI-H847細胞系相關產品:Namalwa細胞、NCI-H-128細胞、IPLB-SF 21AE細胞 Co 115細胞系相關產品:COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞 KGN細胞系相關產品:SO-RB50細胞、HS688AT細胞、SKCO1細胞 MHH-CALL2細胞系相關產品:D-283MED細胞、W133細胞、BE(2)-C細胞 SKRC-52細胞系相關產品:VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞 H69細胞系相關產品:KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞 B-cell with DC Morphology細胞系相關產品:SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞 Loucy細胞系相關產品:Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞 SKml2細胞系相關產品:P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞 TE-10細胞系相關產品:NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞 M210B4細胞系相關產品:BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞 MDA-MB-134-VI細胞系相關產品:MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞 TE1細胞系相關產品:H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞 Tn 5B1-4細胞系相關產品:H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞 SU 86.86細胞系相關產品:UWB1.289細胞、HEK-293 c18細胞、Hs840_T細胞 NCI-H740細胞系相關產品:LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞 NCIH2073細胞系相關產品:BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞 RCC23細胞系相關產品:L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞 769-P細胞系相關產品:143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞 CTV-1細胞系相關產品:P3/NS1/Ag4-1細胞、T-98G細胞、FLS細胞 GM00346B細胞系相關產品:ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞 Lung cancer-1/squamous細胞系相關產品:UM-UC-3細胞、QBC-939細胞、H220細胞 BEL-7405細胞系相關產品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞 HH [Human lymphoma]細胞系相關產品:NCIH1184細胞、H-1882細胞、C2A細胞 Tn 5B1-4細胞系相關產品:H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞 SK-N-BE(2)-C細胞系相關產品:HOS (TE85)細胞、HCC 2185細胞、PL9細胞 OVCAR-432細胞系相關產品:SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞 AR42J細胞系相關產品:COR-L88細胞、TI-73細胞、HeLa S 3細胞 RBE4 epithelioid cells大鼠腦血管內皮細胞系 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