"DOK epithelioid cells人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：口腔異常增生；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
Huh7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819.T細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞、Mono Mac6細(xì)胞
SW837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC 5細(xì)胞、293AD細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞
Hce8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
DOK epithelioid cells人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異，有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買(mǎi)，培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過(guò)０~２０℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時(shí)，更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個(gè)，可以區(qū)分為２００多種不同類(lèi)型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開(kāi)始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G０點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
LTEP-sm 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-6細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞
H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞
L-363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2342細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞
D-324MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 539細(xì)胞、A-875細(xì)胞、OE-33細(xì)胞
SK_HEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 S細(xì)胞、Panc 03.27細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
DOK epithelioid cells人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA1細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞
hOMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細(xì)胞、JM-1細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞
Rat-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞、526細(xì)胞
WEHI3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs294T細(xì)胞、RPMI-7951細(xì)胞、SGC7901/DDP細(xì)胞
NRK 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、GC-1細(xì)胞
Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAI細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞、MCF12A細(xì)胞
PG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 5細(xì)胞、786-O細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞
TE13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1944細(xì)胞、GM05372細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞
Mv.1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細(xì)胞、BC-027細(xì)胞、LICCF細(xì)胞
Wistar Institute-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK(15)細(xì)胞、WM115細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞
DOK epithelioid cells人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞系
SKNO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞、CT26細(xì)胞
NCI-H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/0HK細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞
UM-UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞
HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞
U-373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC 3T3-E1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞
THP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞
THP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞
KP-N-RT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1563細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞、HG2855細(xì)胞
RTMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細(xì)胞、J-111細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞
H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J B-V細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞、McA-RH8994細(xì)胞
Tj-905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH 3細(xì)胞、COLO678細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞
L363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1-6細(xì)胞、H1568細(xì)胞、S180細(xì)胞
GM17346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞
MDA-MB-435 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2細(xì)胞、DHL6細(xì)胞、INS1E細(xì)胞
WM 451-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞
A-375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCa/16A3-F細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞、NR8383細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞
CTLL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-19-19細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞、MC9細(xì)胞
PA12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R-1059-D細(xì)胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞
Caco2-BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞
Adeno 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-824細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞
LAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC 7901細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞
SU-DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞
Vero from pool #76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-3細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞
A9 (Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞
RCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞
Lewis Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI231細(xì)胞、UMNSAH/DF#1細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞
SKNFI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞、WBF344細(xì)胞
P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHLF細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP-77細(xì)胞、JF305細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞
H-1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH77細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞、THLE-3細(xì)胞
CL-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-3細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞
NCI-SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293細(xì)胞、KM12細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞
TSCC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-756細(xì)胞、M4e細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞
HOEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT(H9)細(xì)胞、GDM1細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17219細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞
A 72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC29細(xì)胞、SW-579細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞
SK-MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞、4-1st細(xì)胞
SK-MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞、4-1st細(xì)胞
766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EnCa1細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞、RS4-11細(xì)胞
COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞
H-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV522細(xì)胞、EOC20細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞
LS 123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS1034細(xì)胞、GRSL細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞
MDCK (NBL-2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-26細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞
H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C918細(xì)胞、THP1細(xì)胞、HGC27細(xì)胞
HDLM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細(xì)胞、D407細(xì)胞、H2106細(xì)胞
NCI-H1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC26細(xì)胞、H2030細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞
PA12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R-1059-D細(xì)胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞
HCC-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss/3T3細(xì)胞、HBL100細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞
WC00097細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0202細(xì)胞、MFE-296細(xì)胞、SEM細(xì)胞
P-388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1063細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞
DOK epithelioid cells人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞系
A2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK6細(xì)胞、HRIF細(xì)胞、H508細(xì)胞
NMCG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVSMC細(xì)胞、MeWo細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞
H187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H748細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞、MBT2細(xì)胞
Rat-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞
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