"DOK Cell:人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：口腔異常增生；男性
OV2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4/1細(xì)胞、HRC-99細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞
CAL 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞
H-716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞
P31FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-16細(xì)胞、ME1細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
DOK Cell:人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中相關(guān)問(wèn)題總結(jié)：懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái)，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過(guò)高之轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡；細(xì)胞之接種密度為何？依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)之一重要原因；細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級(jí)和無(wú)菌過(guò)濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級(jí)，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無(wú)菌狀況，次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過(guò)濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細(xì)胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-２０°C不可超過(guò)１小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細(xì)胞欲冷凍保存時(shí)，細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度？冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細(xì)胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí)，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HOS TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone M-3細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞
JG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC9細(xì)胞、High5細(xì)胞、MFE-296細(xì)胞
DHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 BL6細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞、PL-12細(xì)胞
TN5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4;11細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞
OCI-Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL5細(xì)胞、LCMS細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
DOK Cell:人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
BTI-Tn5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 281.T細(xì)胞、CNE2細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞
NPA-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC92A細(xì)胞、H-4細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞
Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB435細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞
M20 [Human melanoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115細(xì)胞、MeT5A細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞
OV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR-1細(xì)胞、RK-13細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞
RH30SJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：End1/E6E7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞、HT22細(xì)胞
Hs 706.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC4細(xì)胞、HCC1438細(xì)胞、HCC-1599細(xì)胞
DOK Cell:人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞系
COLO-824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 341細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞、M1細(xì)胞
WERI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV3121細(xì)胞、AHH1細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞
MAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH820細(xì)胞、TF1細(xì)胞、RBL細(xì)胞
58F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL2細(xì)胞、H1395細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞
786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞
CWR22-R1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bat lung細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、LS-411細(xì)胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細(xì)胞、HT-22細(xì)胞、293FT細(xì)胞
MM96L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-767細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞、IEC18細(xì)胞
293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-668細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞、A431/P細(xì)胞
293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-668細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞、A431/P細(xì)胞
293 Ad5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MO59J細(xì)胞、639V細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞
OV-CA 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞、OP-9細(xì)胞
MDCKII-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-SF細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞、JVM2細(xì)胞
H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-6細(xì)胞、L-929細(xì)胞、SW 756細(xì)胞
H-748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel624細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞
251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578T細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞、HN 4細(xì)胞
MDA 435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞、T47D細(xì)胞
FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞
HTori-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM6細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞
H-650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞
ROS 17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-427細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Ly19細(xì)胞
OCLY8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF-382細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞、U251MG細(xì)胞
NFS60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞
RPMI 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-611-T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞
Panc 3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞
Hs-746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZAWA細(xì)胞、CCRF/CEM-C7細(xì)胞、EAhy926細(xì)胞
SK-MEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV 1細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞
NCI-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL12T細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞
U-266 AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC1細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞、H1819細(xì)胞
TGHAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC70細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞、Raji細(xì)胞
Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB 106細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞
COLO 320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-2細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞
N-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：108CC15細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞
CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/ADR細(xì)胞、U937細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞
686LN-M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-2細(xì)胞、Dx5細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
MKN74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT20細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞
HUCCT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-343-T細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞
H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-6細(xì)胞、L-929細(xì)胞、SW 756細(xì)胞
526 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞
DOK Cell:人口腔黏膜癌前病變細(xì)胞系
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-1細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞
HFT 8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-85-1細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞
PK-136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1876細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞、DHL-8細(xì)胞
COLO 320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-2細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞
159 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2細(xì)胞、H526細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞
Tregs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-3細(xì)胞、SCC9細(xì)胞、SKNBE2細(xì)胞
HuH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH4細(xì)胞、LS 513細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞
HEC1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 2細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞、OE-21細(xì)胞
SK_N_FI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC1細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞、HMC-1細(xì)胞
hA549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT16細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞
Nthy ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-3細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞、RDES細(xì)胞
ONS-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3D4/21細(xì)胞、LS1034細(xì)胞、SW48細(xì)胞
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