"MA-104 epithelioid cells猴胎腎細胞系 細胞背景資料:胚腎;自發(fā)永生 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 Det 562細胞系相關產(chǎn)品:Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞 P30-OHK細胞系相關產(chǎn)品:MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞 HEYA8細胞系相關產(chǎn)品:Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞 細胞生長:貼壁 MA-104 epithelioid cells猴胎腎細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結構,代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 LAD2細胞系相關產(chǎn)品:IPEC-1細胞、RGB細胞、WERIRb1細胞 MSB1細胞系相關產(chǎn)品:LIPF178C細胞、HGC-27細胞、KPL1細胞 BE2M17細胞系相關產(chǎn)品:LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞 PTK1細胞系相關產(chǎn)品:UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞 NCI-H2405細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 MA-104 epithelioid cells猴胎腎細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 HLEC-SRA 01/04細胞系相關產(chǎn)品:Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞 BEL-7405細胞系相關產(chǎn)品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞 Walker/LLC-WRC 256細胞系相關產(chǎn)品:GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞 NCI-H2030細胞系相關產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞 H1666細胞系相關產(chǎn)品:Hs 888.Lu細胞、H-2122細胞、LA795細胞 BRL 3A細胞系相關產(chǎn)品:PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞 SK UT 1細胞系相關產(chǎn)品:SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞 PK-136細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞 TE-7細胞系相關產(chǎn)品:Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞 SNU-216細胞系相關產(chǎn)品:MHCC97-L細胞、JVM-3細胞、M-NFS-60細胞 MA-104 epithelioid cells猴胎腎細胞系 Y3.AG.1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞 HOP92細胞系相關產(chǎn)品:MCF.7細胞、OCI-Ly03細胞、KYSE-270細胞 SW620細胞系相關產(chǎn)品:Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞 MEL-526細胞系相關產(chǎn)品:Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞 NK-92 MI細胞系相關產(chǎn)品:H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞 H-1882細胞系相關產(chǎn)品:IPECJ2細胞、K7M2細胞、MIA PaCa-2細胞 NTERA2細胞系相關產(chǎn)品:NBL-4細胞、NK-92 MI細胞、SW 1353細胞 Panc 3.27細胞系相關產(chǎn)品:J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞 TOV-112D細胞系相關產(chǎn)品:ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞 SKOV-3細胞系相關產(chǎn)品:MOLT 3細胞、MADB-106細胞、G-292細胞 RAW264細胞系相關產(chǎn)品:TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞 HPAF/CD18細胞系相關產(chǎn)品:MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞 BE2M17細胞系相關產(chǎn)品:LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞 HEL92.1.7細胞系相關產(chǎn)品:MLMEC細胞、MDA157細胞、GM05372細胞 KHYG1細胞系相關產(chǎn)品:no-11細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞、P30OHK細胞 MB49細胞系相關產(chǎn)品:HOC細胞、SF-763細胞、Mhh-Call 2細胞 Hs819T細胞系相關產(chǎn)品:HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞 NOK細胞系相關產(chǎn)品:Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞 LAN-6細胞系相關產(chǎn)品:H82sclc細胞、207細胞、CFPAC細胞 CNE1細胞系相關產(chǎn)品:OE33細胞、KMS-11細胞、HEK-293細胞 EBC-1/original細胞系相關產(chǎn)品:Caki-2細胞、ACC-3細胞、AN-3細胞 TR 146細胞系相關產(chǎn)品:SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞 KYSE140細胞系相關產(chǎn)品:H1573細胞、BJ1細胞、H1299細胞 U266-B1細胞系相關產(chǎn)品:PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞 G361-mel細胞系相關產(chǎn)品:KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞 Kit225-K6細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞 293GP細胞系相關產(chǎn)品:BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞 NCIH747細胞系相關產(chǎn)品:SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞 Hca-F細胞系相關產(chǎn)品:ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞 NUGC-4細胞系相關產(chǎn)品:WSU-DLCL-2細胞、CF-1 MEF細胞、Be-Wo細胞 HCC-1500細胞系相關產(chǎn)品:SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞 COLO678細胞系相關產(chǎn)品:P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞 MMAc-SF細胞系相關產(chǎn)品:HEB細胞、Kit-225-K6細胞、MB157細胞 Hepatoma-22細胞系相關產(chǎn)品:NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞 NCIH820細胞系相關產(chǎn)品:HBE細胞、SNU-668細胞、SKBr3細胞 RERF-LC-MS細胞系相關產(chǎn)品:NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞 OVCAR-433細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-435 S細胞、BC3H1細胞、Hs578Bst細胞 A-253細胞系相關產(chǎn)品:RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞 786-0WT細胞系相關產(chǎn)品:PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞 HECV細胞系相關產(chǎn)品:CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞 H378細胞系相關產(chǎn)品:McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞 IM-9細胞系相關產(chǎn)品:SW948細胞、CPA47細胞、NCL-H548細胞 NIE-115細胞系相關產(chǎn)品:MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞 MDAMB-231細胞系相關產(chǎn)品:KTCTL140細胞、SUM 149PT細胞、PC3-M細胞 COV 434細胞系相關產(chǎn)品:HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞 RCF細胞系相關產(chǎn)品:HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞 HO1-N-1細胞系相關產(chǎn)品:143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞 HCAEC細胞系相關產(chǎn)品:NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞 Mono Mac 1細胞系相關產(chǎn)品:BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞 TCam-2細胞系相關產(chǎn)品:SKMES-1細胞、NB-9細胞、HFF細胞 WM 266-4細胞系相關產(chǎn)品:CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞 MA-104 epithelioid cells猴胎腎細胞系 SK-ES1細胞系相關產(chǎn)品:HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞 2PK-3細胞系相關產(chǎn)品:OC-3-VGH細胞、Detroit562細胞、HCC1428細胞 PLB 985細胞系相關產(chǎn)品:SHI1細胞、NALM 6細胞、CWR22R-V1細胞 Walker/LLC-WRC 256細胞系相關產(chǎn)品:GM05384細胞、SuDHL 10細胞、CAMA1細胞 "
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