"CMT64 epithelioid cells小鼠肺腺癌細胞系
細胞背景資料：肺腺癌；雌性；C５７
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
WM 239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAEC細胞、DLD-1細胞、HCT8細胞
NCIH1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178-R細胞、WRL68細胞、HCC-827細胞
細胞生長：貼壁
CMT64 epithelioid cells小鼠肺腺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
H-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞
OCI-Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞
SW-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞
DC2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2-DAP細胞、PK136細胞、HNSC細胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CMT64 epithelioid cells小鼠肺腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
BMDC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞
Rat Glomerular Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞
H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
WERI-Rb1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞
H-1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞
HGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞
COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
NCIH1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
AQ-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149PT細胞、NCI522細胞、Jurkat E6.1細胞
SCC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞
CMT64 epithelioid cells小鼠肺腺癌細胞系
LM-TK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞
HMO6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞
Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞
P3JHR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞
OCILY7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞
HCa/16A3-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHEP1細胞、CCK-81細胞、RA.1細胞
HCa/16A3-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHEP1細胞、CCK-81細胞、RA.1細胞
HIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞
MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞
Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞
PL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞
B16/F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞
NCI-H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞
KYSE450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
HCC-2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品：746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞
UCLA-RO 81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM TK negative細胞、MDAMB175細胞、OVCAR 5細胞
MUG-Chor1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞
FHs 74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL1細胞、H-510細胞、HEC-251細胞
HCC1954 BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
CEMC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞
HBZY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-3細胞、HSC1細胞、P-388細胞
ROS1728細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T_T_細胞、SW962細胞、SW 954細胞
Ca 9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞
HCT/Taxo1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞
SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
KMS18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
BC-021細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、BRL細胞、MDA-MB 453細胞
KM H-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1838細胞、Kit 225細胞、AZ521細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
G361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞
NCI-H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞
MDA1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞
SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
PFSK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞
Jurkat-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney-21細胞、WM-451Lu細胞、NIH 3T6細胞
MAD109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞
L6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞
JEG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞
TO175T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT167細胞、U-343 MG細胞、LM TK negative細胞
HH [Human lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1184細胞、H-1882細胞、C2A細胞
LOU-NH-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞
RGC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞
Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH211細胞、GC9811-P細胞、NCI-BL1339細胞
SW1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞
VE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞
NCI-H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
Mouse podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞
HNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞
CMT64 epithelioid cells小鼠肺腺癌細胞系
Vero-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-513細胞、KMH-2細胞、PSN1細胞
CBRH-7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH-S細胞、Colo16細胞、REC1細胞
COV 434細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/EBNA細胞、NCI-N87細胞、SKNBE(1)細胞
H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K1細胞、MMVECs細胞、16-HBEo細胞
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