"LA-795 epithelioid cells小鼠肺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:肺癌;男性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 Madison細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RF/6A細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞 High Five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN-205細(xì)胞、SW-48細(xì)胞、D-341細(xì)胞 KTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226細(xì)胞、UMC11細(xì)胞、A 375細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 LA-795 epithelioid cells小鼠肺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同時(shí),務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對(duì)細(xì)胞而言差異極大,請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺(tái)內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SK-ChA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞 Panc-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC3細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞 MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞 C2BBe1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細(xì)胞、GT39細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞 HEK-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 LA-795 epithelioid cells小鼠肺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! 251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578T細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞、HN 4細(xì)胞 Caov-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO 11細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞 HMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-M17細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞 SKRC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VA-ES-BJ細(xì)胞、Ly19細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞 H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-13細(xì)胞、H-2405細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞 OCIAML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF1細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞 CEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、343 MG細(xì)胞、MALME 3M細(xì)胞 HCC-1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256-TC細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞、MEF細(xì)胞 SUM-149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞 5-8F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs852細(xì)胞、TE1細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞 LA-795 epithelioid cells小鼠肺腺癌細(xì)胞系 293c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH23細(xì)胞、UO31細(xì)胞、BC-023細(xì)胞 NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 100細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞 SHP77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-683細(xì)胞、PFSK細(xì)胞、TE-10細(xì)胞 RKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM451Lu細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞、HSC(Human Schwann)細(xì)胞 CAL-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞 JeKo 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-2細(xì)胞、TE-8細(xì)胞、hOMF細(xì)胞 JeKo 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-2細(xì)胞、TE-8細(xì)胞、hOMF細(xì)胞 UMUC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCAEC細(xì)胞、NS-20Y細(xì)胞、CTLL2細(xì)胞 HFLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC11細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞、HEM細(xì)胞 SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞 Line 870 Emory University-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoTr細(xì)胞、U343細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞 PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞 MHCC97L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞 WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞 H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIN6細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞 UPCI-SCC-090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20-S細(xì)胞、R3/1細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞 P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細(xì)胞、NCI.H460細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞 Adeno 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-824細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞 LED-WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVOG細(xì)胞、H1404細(xì)胞、ARO-81細(xì)胞 LS411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞 MV522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-28細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞 MIA-PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞 H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞 PL9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞 BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H209細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞、COLO679細(xì)胞 RPMI #1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細(xì)胞、HSC4細(xì)胞、HS578T細(xì)胞 Natural Killer-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL15細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞、H-865細(xì)胞 MDA-MB-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞 CAL62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞 OVCA433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-9706細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞、NCI-H2029細(xì)胞 Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST486細(xì)胞、VP303細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞 MLMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞 IPECJ2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC-20細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞 HCC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2171細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞、MGC803細(xì)胞 MOLP-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 742.T細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞、SNU475細(xì)胞 NCIH1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 1034細(xì)胞、IEC18細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞 MRC-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞、HO8910細(xì)胞 hRPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0504細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、KCL-22細(xì)胞 BT325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY細(xì)胞、J82細(xì)胞、HuH7細(xì)胞 D283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL3細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、Det 562細(xì)胞 HIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞 Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH-7919細(xì)胞、H-748細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞 Co 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO829細(xì)胞、JHH7細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞 Hs688(A)T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266-4細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞 SN12PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞 CMT.64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv.1.Lu細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞 MDA231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CSQT-2細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞 USMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UT7細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞 WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞 HOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98 G細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞、SW962細(xì)胞 RPMI #8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:He La細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、SKNBE-2細(xì)胞 LA-795 epithelioid cells小鼠肺腺癌細(xì)胞系 Keio University-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF539細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞 U-118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-15細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞、VMM5細(xì)胞 B16/BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ketr 3細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞 HMEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm 1細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞 "
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