"KYSE-50 epithelioid cells低分化人食管鱗癌細胞系
細胞背景資料:食管鱗癌;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞
Anip-973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞
HR-8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞
細胞生長:貼壁
KYSE-50 epithelioid cells低分化人食管鱗癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
RPE1-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞
LK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAEC細胞、COLO 829細胞、A1847細胞
HIEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞
MX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KYSE-50 epithelioid cells低分化人食管鱗癌細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
B78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI6666細胞、SW-1783細胞、ASH3細胞
He La細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞
AMJ2C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 2細胞、BE2C細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞
H8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
MPC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK 1細胞、H1238細胞、CF-PAC1細胞
BetaTC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞
U937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞
MDA-MB-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞
NCIH2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞
MHCC 97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
KYSE-50 epithelioid cells低分化人食管鱗癌細胞系
MHCC-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞
SKNBE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV-433細胞、BC3H-1細胞、JS1細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
MOLP8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞
G422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
GC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
GC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
H-1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞
hTERT-RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞
Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-4細胞、102PT細胞、GalK 1細胞
SUDHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
NIH:OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞
CEM-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞
LuCL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD 18細胞、BC-025細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞
T241細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
ID8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞
SW48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
U 937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAHY-926細胞、N1S1細胞、HBdSMC細胞
HM1900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636.T細胞、RFL6細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞
COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
SW-1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞
DMS 53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞
L5178YR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞
Fao細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞
Hep 3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT-1細胞、CCD-841-CoN細胞、769-P細胞
NCI-H1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT3細胞、P 3 HR 1細胞、CCD 1112SK細胞
Tn5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞
MDA-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7-CTRL細胞、C-28/I2細胞、MFE-280細胞
JKT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞
GM03671C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞
OCM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
AML12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞
NPA-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC92A細胞、H-4細胞、SUPT-1細胞
CWR22R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
IM9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang Cells細胞、W256細胞、FTC133細胞
PC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞
BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
MT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
UACC-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞
JB 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞
NCI-H209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA.1細胞、H1693細胞、KBM-7細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
NCIH2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞
786-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
NCI-H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞
PC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞
H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639 V細胞、VK-2/E6E7細胞、NOK細胞
P31FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞
RBL 2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞
KYSE-50 epithelioid cells低分化人食管鱗癌細胞系
NCI-H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞
WSU-DLCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-95-2細胞、COLO-741細胞、NIH:OVCAR-8細胞
Lewis lung carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duck embryo細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Hs840_T細胞
AMJ2C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 2細胞、639 V細胞、NCI-HUT-292細胞
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