"MNNG/HOS Cl #5 epithelioid cells人骨肉瘤細胞系 細胞背景資料:骨肉瘤;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! A7r5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞 MCF-7/AdrR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞 HANK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞 細胞生長:貼壁 MNNG/HOS Cl #5 epithelioid cells人骨肉瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HEK-293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞 CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞 SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2/D1細胞、PANC-03-27細胞、DSL-6A-C1細胞 BetaTC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞 P388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MNNG/HOS Cl #5 epithelioid cells人骨肉瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞 L 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞 NCTC clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞 NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞 H-1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞 MARC145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞 A10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞 CAL 120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞 SU-DHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞 MCA38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞 MNNG/HOS Cl #5 epithelioid cells人骨肉瘤細胞系 YES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H889細胞、OCI-LY-18細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞 MIA Paca2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-28細胞、rRTEC細胞、BL2141細胞 MKN74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞 H-716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞 MDA231-LM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞 LC-2 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞 LC-2 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞 MDA-MB-134 VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G292細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞、Plaepi 34細胞 293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞 Hs706T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR786細胞、JC細胞、Panc02細胞 COLO 829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞 TK 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞 CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞 HEL299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞 NCTC929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞 Tadarida brasiliensis 1 lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA-1細胞、SCC15細胞、P30/OHK細胞 SUNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞 Scott and White No. 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞 NKL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞 NCIH2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞 NWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞 HRA 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞 159 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞 NCIH2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FD-LSC-1細胞、CCD1095Sk細胞、CT26.WT細胞 LLC-PK(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞 TE 354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞 H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞 C33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞 NCI-H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞 SVGp12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞 RH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞 UMR-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞 Normal Rat Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526 mel細胞、HVSMC細胞、Hepa-RG細胞 Hi5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞 H22-H8D8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞 U20S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP-293細胞、HNE-1細胞、GA-10(Clone 4)細胞 HCC-1171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-10A細胞、LNCaP.FGC細胞、FDC-P1細胞 LN 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞 P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞 LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞 NE-4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-136細胞、rRMECs細胞、NuTu-19細胞 BEL-7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞 SUM-102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞 Baby Hamster Kidney 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞 J774 A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895.T細胞、C-26細胞、OCIAML3細胞 B16 BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞 NBL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞 MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞 TCam-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES-1細胞、NB-9細胞、HFF細胞 NB4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞 Neuro-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞 MNNG/HOS Cl #5 epithelioid cells人骨肉瘤細胞系 WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞 GA-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3-L1細胞、MC-38細胞、MDA-MB-175細胞 RPMI8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33 A細胞、HSC6細胞、BCECs細胞 NCTC clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB157細胞、OAC-P4C細胞、NCI-H1651細胞 "
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