"DH82 epithelioid cells狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
細胞背景資料：腎；Golden Retrieve
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
KE39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞
MHCC97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞
細胞生長：貼壁
DH82 epithelioid cells狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
WRL68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞
HARA-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞
Y3-Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞
P3X63Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞
HOMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES細胞、KYSE-510細胞、BEL 7404細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
DH82 epithelioid cells狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
CHP-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞
HSC 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞
OVCA432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 19-19細胞、REC-1細胞、H-838細胞
PANC 813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT GEO細胞、MESSADX5細胞、PM6細胞
BS-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞
Psi-2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞
GM06141B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞
H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞
H-2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞
B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLTC-1細胞、HT 29細胞、OVCAR-3細胞
DH82 epithelioid cells狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
CWR22-Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞
CDC/EU.HMEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞
NIT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞
Hs600T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞
Hs 870.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
LC-1Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
SKNAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
Farage細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 52E細胞、NTera2/D1細胞、H-1522細胞
HM1900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636.T細胞、RFL6細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞
PIG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L78細胞、FTC133細胞、SKMEL24細胞
LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1963細胞、SNU601細胞、NCI-H2170細胞
Hs 940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞
KOPN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞
RC-K8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-FT細胞、Molm 14細胞、KLN205細胞
TE7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
BIU-87/Adr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 432細胞、PF-382細胞、KYSE50細胞
OCILY7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞
COS7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞
PaTu 8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品：22Rv1細胞、HK2細胞、NCTC 929細胞
LTEPa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞
AML193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞
SCL II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS-2細胞、HO-8910細胞、J774.A1細胞
Lieming Xu-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC細胞、H810細胞、U251n細胞
RS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
HCC78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
Pa18C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞
CEM-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
GM04679細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞
SUDHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
624 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
SK-BR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
PLA-802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
HGC27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞
SUP-M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
Hs606T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
HCEC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-637細胞、HSF2細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞
SW1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞
A 2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞
LU165細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞
Hs888Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞
PANC3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-B細胞、AU 565細胞、SNGM細胞
FC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac1細胞、HEK-A細胞、AM38細胞
Human podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞
HCPEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-67細胞、NCIH2172細胞、C2-C12細胞
RT-BM 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞
J774 A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895.T細胞、C-26細胞、OCIAML3細胞
NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
NCI-H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞
NOZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞
NCI-H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H441細胞、GM03671細胞、SK-HEP-1細胞
DH82 epithelioid cells狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
MDA-PCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2110細胞、HT144mel細胞、MLMEC細胞
NCI-H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92細胞、MyLa 2059細胞、KM12-SM細胞
Ramos(RA1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-J2細胞、NCI-H2342細胞、BEL-7404細胞
OVCA432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 19-19細胞、HOS-143B細胞、ATDC-5細胞
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